科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2000年
13期
1392-1397
,共6页
刘军%袁自强%刘建东%钱晓茵%钱文%杨金水
劉軍%袁自彊%劉建東%錢曉茵%錢文%楊金水
류군%원자강%류건동%전효인%전문%양금수
抑制差减杂交技术%茎尖分生组织%幼穗分生组织
抑製差減雜交技術%莖尖分生組織%幼穗分生組織
억제차감잡교기술%경첨분생조직%유수분생조직
以水稻茎尖分生组织(shoot apical meristem, SAM)为对照群体, 幼穗分生组织(primary and secondary branch primordia, Pb/Sb)为目标群体, 进行抑制差减杂交.用经过SAM cDNA差减的Pb/Sb cDNA群体构建了一个差减文库. 通过差示筛选鉴定了40个在Pb/Sb中特异表达或表达增强的候选克隆.Northern杂交验证, 至少40%的候选克隆代表了在Pb/Sb中特异表达或表达增强的基因, 同时, 相当一部分克隆为低丰度转录本.对40个cDNA克隆单向测序后, 与GenBank中同源序列进行比较, 结果表明: 2个克隆为已知水稻基因;11个克隆与已知基因的同源性为60%~90%;另有18个克隆在GenBank 中无法查到对应的同源基因, 可能代表了新基因, 或是由于序列位于变异丰富的3′端故而无法查到与其他物种基因的同源性.目前为止, 已有19个基因在GenBank注册并获登录号.
以水稻莖尖分生組織(shoot apical meristem, SAM)為對照群體, 幼穗分生組織(primary and secondary branch primordia, Pb/Sb)為目標群體, 進行抑製差減雜交.用經過SAM cDNA差減的Pb/Sb cDNA群體構建瞭一箇差減文庫. 通過差示篩選鑒定瞭40箇在Pb/Sb中特異錶達或錶達增彊的候選剋隆.Northern雜交驗證, 至少40%的候選剋隆代錶瞭在Pb/Sb中特異錶達或錶達增彊的基因, 同時, 相噹一部分剋隆為低豐度轉錄本.對40箇cDNA剋隆單嚮測序後, 與GenBank中同源序列進行比較, 結果錶明: 2箇剋隆為已知水稻基因;11箇剋隆與已知基因的同源性為60%~90%;另有18箇剋隆在GenBank 中無法查到對應的同源基因, 可能代錶瞭新基因, 或是由于序列位于變異豐富的3′耑故而無法查到與其他物種基因的同源性.目前為止, 已有19箇基因在GenBank註冊併穫登錄號.
이수도경첨분생조직(shoot apical meristem, SAM)위대조군체, 유수분생조직(primary and secondary branch primordia, Pb/Sb)위목표군체, 진행억제차감잡교.용경과SAM cDNA차감적Pb/Sb cDNA군체구건료일개차감문고. 통과차시사선감정료40개재Pb/Sb중특이표체혹표체증강적후선극륭.Northern잡교험증, 지소40%적후선극륭대표료재Pb/Sb중특이표체혹표체증강적기인, 동시, 상당일부분극륭위저봉도전록본.대40개cDNA극륭단향측서후, 여GenBank중동원서렬진행비교, 결과표명: 2개극륭위이지수도기인;11개극륭여이지기인적동원성위60%~90%;령유18개극륭재GenBank 중무법사도대응적동원기인, 가능대표료신기인, 혹시유우서렬위우변이봉부적3′단고이무법사도여기타물충기인적동원성.목전위지, 이유19개기인재GenBank주책병획등록호.
