第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2000年
12期
1461-1464
,共4页
仇凯%陈志南%刘彦仿%曲萍%金晶%胡沛臻%朱晓慧%徐力青
仇凱%陳誌南%劉彥倣%麯萍%金晶%鬍沛臻%硃曉慧%徐力青
구개%진지남%류언방%곡평%금정%호패진%주효혜%서력청
葡糖醛酸酶%肝细胞癌%表达载体%前体药物%转染
葡糖醛痠酶%肝細胞癌%錶達載體%前體藥物%轉染
포당철산매%간세포암%표체재체%전체약물%전염
目的建立高表达β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Glu)的肝癌细胞株.方法采用脂质体介导法,将重组逆转录病毒表达载体pDOR-βG转染肝癌细胞,G418筛选出阳性克隆,用免疫组化法、酶组织化学法、原位杂交法及酶活性测定等方法观察β-Glu表达情况.结果共获得4株转染阳性克隆,其中F1,H4为β-Glu高表达克隆.免疫组化法发现转染细胞β-Glu免疫阳性物质主要分布于胞质及胞核内,酶组织化学法观察转染细胞酶活性产物主要集中于胞质中,且转染细胞较非转染细胞呈色深.原位杂交法观察阳性杂交信号于胞质及胞核,甚至核仁中, 且在转染细胞中杂交信号增强.结论通过转入人β-Glu基因可以建立β -Glu肝癌高表达模型 .该模型的建立,既可用于观察β-Glu前体药物的基因治疗效果,也能观察β-Glu基因表达对肝癌细胞表型和侵袭能力的影响.
目的建立高錶達β-葡萄糖醛痠苷酶(β-Glu)的肝癌細胞株.方法採用脂質體介導法,將重組逆轉錄病毒錶達載體pDOR-βG轉染肝癌細胞,G418篩選齣暘性剋隆,用免疫組化法、酶組織化學法、原位雜交法及酶活性測定等方法觀察β-Glu錶達情況.結果共穫得4株轉染暘性剋隆,其中F1,H4為β-Glu高錶達剋隆.免疫組化法髮現轉染細胞β-Glu免疫暘性物質主要分佈于胞質及胞覈內,酶組織化學法觀察轉染細胞酶活性產物主要集中于胞質中,且轉染細胞較非轉染細胞呈色深.原位雜交法觀察暘性雜交信號于胞質及胞覈,甚至覈仁中, 且在轉染細胞中雜交信號增彊.結論通過轉入人β-Glu基因可以建立β -Glu肝癌高錶達模型 .該模型的建立,既可用于觀察β-Glu前體藥物的基因治療效果,也能觀察β-Glu基因錶達對肝癌細胞錶型和侵襲能力的影響.
목적건립고표체β-포도당철산감매(β-Glu)적간암세포주.방법채용지질체개도법,장중조역전록병독표체재체pDOR-βG전염간암세포,G418사선출양성극륭,용면역조화법、매조직화학법、원위잡교법급매활성측정등방법관찰β-Glu표체정황.결과공획득4주전염양성극륭,기중F1,H4위β-Glu고표체극륭.면역조화법발현전염세포β-Glu면역양성물질주요분포우포질급포핵내,매조직화학법관찰전염세포매활성산물주요집중우포질중,차전염세포교비전염세포정색심.원위잡교법관찰양성잡교신호우포질급포핵,심지핵인중, 차재전염세포중잡교신호증강.결론통과전입인β-Glu기인가이건립β -Glu간암고표체모형 .해모형적건립,기가용우관찰β-Glu전체약물적기인치료효과,야능관찰β-Glu기인표체대간암세포표형화침습능력적영향.
