农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2003年
1期
83-88
,共6页
王元火%姚斌%袁铁铮%操时树%张伟%王亚茹%范云六
王元火%姚斌%袁鐵錚%操時樹%張偉%王亞茹%範雲六
왕원화%요빈%원철쟁%조시수%장위%왕아여%범운륙
环状芽孢杆菌%乳糖酶%基因表达%酶学性质
環狀芽孢桿菌%乳糖酶%基因錶達%酶學性質
배상아포간균%유당매%기인표체%매학성질
将环状芽孢杆菌(Bacillus circulaus)中的乳糖酶基因在大肠杆菌(Escherichia coli)中进行了高效表达,并测定了表达的乳糖酶的基本酶学性质.结果表明,表达的乳糖酶有生物学活性,但与来源于环状芽孢杆菌的原始酶相比,其酶促反应的最适pH、最适温度、Km值,以及酶的pH稳定性和温度稳定性等酶学性质均有较大变化.表达的乳糖酶最适pH为5.0,低于原始酶的pH 6.5;最适温度为37℃,而原始酶为55℃;其耐酸性、耐热性及对金属离子的抗性等方面比原酶有所提高;而且表达的乳糖酶Km比原始酶小285倍、Vmax比原始酶大5.4倍,表明经大肠杆菌表达的乳糖酶有较高的底物亲和力,酶促反应效率更高.从乳糖酶的单位表达量来看,原始酶在环状芽孢杆菌的表达量为20.98 U/mL,而在大肠杆菌中的表达量提高到33.102U/mL.
將環狀芽孢桿菌(Bacillus circulaus)中的乳糖酶基因在大腸桿菌(Escherichia coli)中進行瞭高效錶達,併測定瞭錶達的乳糖酶的基本酶學性質.結果錶明,錶達的乳糖酶有生物學活性,但與來源于環狀芽孢桿菌的原始酶相比,其酶促反應的最適pH、最適溫度、Km值,以及酶的pH穩定性和溫度穩定性等酶學性質均有較大變化.錶達的乳糖酶最適pH為5.0,低于原始酶的pH 6.5;最適溫度為37℃,而原始酶為55℃;其耐痠性、耐熱性及對金屬離子的抗性等方麵比原酶有所提高;而且錶達的乳糖酶Km比原始酶小285倍、Vmax比原始酶大5.4倍,錶明經大腸桿菌錶達的乳糖酶有較高的底物親和力,酶促反應效率更高.從乳糖酶的單位錶達量來看,原始酶在環狀芽孢桿菌的錶達量為20.98 U/mL,而在大腸桿菌中的錶達量提高到33.102U/mL.
장배상아포간균(Bacillus circulaus)중적유당매기인재대장간균(Escherichia coli)중진행료고효표체,병측정료표체적유당매적기본매학성질.결과표명,표체적유당매유생물학활성,단여래원우배상아포간균적원시매상비,기매촉반응적최괄pH、최괄온도、Km치,이급매적pH은정성화온도은정성등매학성질균유교대변화.표체적유당매최괄pH위5.0,저우원시매적pH 6.5;최괄온도위37℃,이원시매위55℃;기내산성、내열성급대금속리자적항성등방면비원매유소제고;이차표체적유당매Km비원시매소285배、Vmax비원시매대5.4배,표명경대장간균표체적유당매유교고적저물친화력,매촉반응효솔경고.종유당매적단위표체량래간,원시매재배상아포간균적표체량위20.98 U/mL,이재대장간균중적표체량제고도33.102U/mL.
