癌症
癌癥
암증
CHINESE JOURNAL OF CANCER
2002年
10期
1041-1046
,共6页
白细胞介素-12%H-2Kb%脂质体%肝肿瘤%基因治疗
白細胞介素-12%H-2Kb%脂質體%肝腫瘤%基因治療
백세포개소-12%H-2Kb%지질체%간종류%기인치료
背景与目的:白细胞介素-12及MHCⅠ基因均已单独用于肿瘤基因治疗.为探索两者的抗肿瘤协同效应,本研究探讨小鼠白细胞介素-12(mIL-12)基因与同种异型的MHCⅠ(小鼠为H-2K)基因联合治疗Balb/C小鼠实验性肝癌.方法:分别应用含mIL-12基因、C57BL/6小鼠H-2KbcDNA及绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的真核表达质粒载体pcDNA3,体外经新型脂质体LipofectAMINE 2000(LF2000)介导转染小鼠肝癌细胞株MM45T.Li,检测转染细胞外源基因的表达.将经LF2000介导pcDNA3/mIL-12与pcDNA3/H-2Kb转染的MM45T.Li细胞,注射于小鼠皮下,观察致瘤性的变化.在荷瘤Balb/C小鼠瘤内注射上述脂质体-DNA复合物,观察瘤体生长情况及小鼠生存期的改变.结果:LF2000介导pcDNA3/GFP转染MM45T.Li细胞的最佳条件为脂质体与DNA为3∶1(μg∶μg),转染效率达30%.经LF2000介导pcDNA3/mIL-12与pcDNA3/H-2Kb转染的MM45T.Li细胞,RT-PCR检测有mIL-12和H-2Kbc DNA的特异扩增片段,Western Blot检测显示有57kDaH-2Kb蛋白表达,ELISA检测mIL-12分泌量达48ng/ml/106细胞.经LF2000介导pcDNA3/mIL-12与pcDNA3/H-2Kb转染的MM45T.Li细胞,其致瘤性下降;荷瘤Balb/C小鼠瘤内注射该脂质体-DNA复合物,FACS检测显示小鼠脾脏淋巴细胞中CD3+、CD4+和CD8+的数量治疗组较对照组高,肿瘤生长相对缓慢,且pcDNA3/mIL-12与pcDNA3/H-2Kb联合治疗具有一定的正协同效应.结论:mIL-12基因与MHCⅠ基因联合治疗小鼠肝癌具有正协同效应,增强了抗肿瘤效果.
揹景與目的:白細胞介素-12及MHCⅠ基因均已單獨用于腫瘤基因治療.為探索兩者的抗腫瘤協同效應,本研究探討小鼠白細胞介素-12(mIL-12)基因與同種異型的MHCⅠ(小鼠為H-2K)基因聯閤治療Balb/C小鼠實驗性肝癌.方法:分彆應用含mIL-12基因、C57BL/6小鼠H-2KbcDNA及綠色熒光蛋白(GFP)報告基因的真覈錶達質粒載體pcDNA3,體外經新型脂質體LipofectAMINE 2000(LF2000)介導轉染小鼠肝癌細胞株MM45T.Li,檢測轉染細胞外源基因的錶達.將經LF2000介導pcDNA3/mIL-12與pcDNA3/H-2Kb轉染的MM45T.Li細胞,註射于小鼠皮下,觀察緻瘤性的變化.在荷瘤Balb/C小鼠瘤內註射上述脂質體-DNA複閤物,觀察瘤體生長情況及小鼠生存期的改變.結果:LF2000介導pcDNA3/GFP轉染MM45T.Li細胞的最佳條件為脂質體與DNA為3∶1(μg∶μg),轉染效率達30%.經LF2000介導pcDNA3/mIL-12與pcDNA3/H-2Kb轉染的MM45T.Li細胞,RT-PCR檢測有mIL-12和H-2Kbc DNA的特異擴增片段,Western Blot檢測顯示有57kDaH-2Kb蛋白錶達,ELISA檢測mIL-12分泌量達48ng/ml/106細胞.經LF2000介導pcDNA3/mIL-12與pcDNA3/H-2Kb轉染的MM45T.Li細胞,其緻瘤性下降;荷瘤Balb/C小鼠瘤內註射該脂質體-DNA複閤物,FACS檢測顯示小鼠脾髒淋巴細胞中CD3+、CD4+和CD8+的數量治療組較對照組高,腫瘤生長相對緩慢,且pcDNA3/mIL-12與pcDNA3/H-2Kb聯閤治療具有一定的正協同效應.結論:mIL-12基因與MHCⅠ基因聯閤治療小鼠肝癌具有正協同效應,增彊瞭抗腫瘤效果.
배경여목적:백세포개소-12급MHCⅠ기인균이단독용우종류기인치료.위탐색량자적항종류협동효응,본연구탐토소서백세포개소-12(mIL-12)기인여동충이형적MHCⅠ(소서위H-2K)기인연합치료Balb/C소서실험성간암.방법:분별응용함mIL-12기인、C57BL/6소서H-2KbcDNA급록색형광단백(GFP)보고기인적진핵표체질립재체pcDNA3,체외경신형지질체LipofectAMINE 2000(LF2000)개도전염소서간암세포주MM45T.Li,검측전염세포외원기인적표체.장경LF2000개도pcDNA3/mIL-12여pcDNA3/H-2Kb전염적MM45T.Li세포,주사우소서피하,관찰치류성적변화.재하류Balb/C소서류내주사상술지질체-DNA복합물,관찰류체생장정황급소서생존기적개변.결과:LF2000개도pcDNA3/GFP전염MM45T.Li세포적최가조건위지질체여DNA위3∶1(μg∶μg),전염효솔체30%.경LF2000개도pcDNA3/mIL-12여pcDNA3/H-2Kb전염적MM45T.Li세포,RT-PCR검측유mIL-12화H-2Kbc DNA적특이확증편단,Western Blot검측현시유57kDaH-2Kb단백표체,ELISA검측mIL-12분비량체48ng/ml/106세포.경LF2000개도pcDNA3/mIL-12여pcDNA3/H-2Kb전염적MM45T.Li세포,기치류성하강;하류Balb/C소서류내주사해지질체-DNA복합물,FACS검측현시소서비장림파세포중CD3+、CD4+화CD8+적수량치료조교대조조고,종류생장상대완만,차pcDNA3/mIL-12여pcDNA3/H-2Kb연합치료구유일정적정협동효응.결론:mIL-12기인여MHCⅠ기인연합치료소서간암구유정협동효응,증강료항종류효과.
