中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2002年
5期
481-483
,共3页
牛廷献%刘明远%卢强%付宝权%吴秀萍%郑明光%Pascal Boireau
牛廷獻%劉明遠%盧彊%付寶權%吳秀萍%鄭明光%Pascal Boireau
우정헌%류명원%로강%부보권%오수평%정명광%Pascal Boireau
旋毛虫%新生幼虫期特异性基因%原核表达%Western-blotting
鏇毛蟲%新生幼蟲期特異性基因%原覈錶達%Western-blotting
선모충%신생유충기특이성기인%원핵표체%Western-blotting
旋毛虫新生幼虫期特异性G10-7基因从PBK-CMV-G10-7重组质粒中亚克隆到pET-28b(+)原核表达载体上,成功地构建了重组表达质粒pET-28b-G10-7.将其转化到大肠杆菌DE3感受态细胞中,经IPTG诱导表达,其细菌裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子质量约为34 000的目的蛋白带,且随诱导时间的延长蛋白表达量逐渐增加,诱导4 h达到峰值,薄层扫描结果显示,目的蛋白占菌体总蛋白的61.7%.Western-blotting检测显示,此蛋白可被感染旋毛虫家猪阳性血清所识别,表明该蛋白具有良好的抗原性.
鏇毛蟲新生幼蟲期特異性G10-7基因從PBK-CMV-G10-7重組質粒中亞剋隆到pET-28b(+)原覈錶達載體上,成功地構建瞭重組錶達質粒pET-28b-G10-7.將其轉化到大腸桿菌DE3感受態細胞中,經IPTG誘導錶達,其細菌裂解物經SDS-PAGE電泳可檢測到相對分子質量約為34 000的目的蛋白帶,且隨誘導時間的延長蛋白錶達量逐漸增加,誘導4 h達到峰值,薄層掃描結果顯示,目的蛋白佔菌體總蛋白的61.7%.Western-blotting檢測顯示,此蛋白可被感染鏇毛蟲傢豬暘性血清所識彆,錶明該蛋白具有良好的抗原性.
선모충신생유충기특이성G10-7기인종PBK-CMV-G10-7중조질립중아극륭도pET-28b(+)원핵표체재체상,성공지구건료중조표체질립pET-28b-G10-7.장기전화도대장간균DE3감수태세포중,경IPTG유도표체,기세균렬해물경SDS-PAGE전영가검측도상대분자질량약위34 000적목적단백대,차수유도시간적연장단백표체량축점증가,유도4 h체도봉치,박층소묘결과현시,목적단백점균체총단백적61.7%.Western-blotting검측현시,차단백가피감염선모충가저양성혈청소식별,표명해단백구유량호적항원성.
