中国人兽共患病杂志
中國人獸共患病雜誌
중국인수공환병잡지
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2002年
5期
25-28
,共4页
童畅%沈际佳%蒋作君%汪学龙
童暢%瀋際佳%蔣作君%汪學龍
동창%침제가%장작군%왕학룡
日本血吸虫%磷酸丙糖转移酶%基因表达
日本血吸蟲%燐痠丙糖轉移酶%基因錶達
일본혈흡충%린산병당전이매%기인표체
目的对血吸虫磷酸丙糖转移酶基因进行克隆及原核表达,以寻找新的预防日本血吸虫感染的疫苗候选分子.方法用血吸虫病人阳性混合血清经大肠杆菌预吸收后对日本血吸虫童虫cDNA文库进行免疫学筛选,所获阳性克隆测序后,送GenBank BLAST进行蛋白质序列同源性比较,证实与其它物种的磷酸丙糖转移酶有很高的同源性.将其克隆入pGEM-T载体质粒,再定向亚克隆入pBK-CMV表达质粒载体上经IPTG诱导表达后,用SDS-PAGE和Western-blot分析和鉴定表达产物.结果用PCR和EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定均证实TPM基因的重组成功,表达产物为32kD的融合蛋白,表达产物可被免疫阳性血清识别.结论首次成功构建编码日本血吸虫磷酸丙糖转移酶基因表达载体克隆,为进一步研究其作为疫苗分子的可能性奠定基础.
目的對血吸蟲燐痠丙糖轉移酶基因進行剋隆及原覈錶達,以尋找新的預防日本血吸蟲感染的疫苗候選分子.方法用血吸蟲病人暘性混閤血清經大腸桿菌預吸收後對日本血吸蟲童蟲cDNA文庫進行免疫學篩選,所穫暘性剋隆測序後,送GenBank BLAST進行蛋白質序列同源性比較,證實與其它物種的燐痠丙糖轉移酶有很高的同源性.將其剋隆入pGEM-T載體質粒,再定嚮亞剋隆入pBK-CMV錶達質粒載體上經IPTG誘導錶達後,用SDS-PAGE和Western-blot分析和鑒定錶達產物.結果用PCR和EcoRⅠ、XhoⅠ雙酶切鑒定均證實TPM基因的重組成功,錶達產物為32kD的融閤蛋白,錶達產物可被免疫暘性血清識彆.結論首次成功構建編碼日本血吸蟲燐痠丙糖轉移酶基因錶達載體剋隆,為進一步研究其作為疫苗分子的可能性奠定基礎.
목적대혈흡충린산병당전이매기인진행극륭급원핵표체,이심조신적예방일본혈흡충감염적역묘후선분자.방법용혈흡충병인양성혼합혈청경대장간균예흡수후대일본혈흡충동충cDNA문고진행면역학사선,소획양성극륭측서후,송GenBank BLAST진행단백질서렬동원성비교,증실여기타물충적린산병당전이매유흔고적동원성.장기극륭입pGEM-T재체질립,재정향아극륭입pBK-CMV표체질립재체상경IPTG유도표체후,용SDS-PAGE화Western-blot분석화감정표체산물.결과용PCR화EcoRⅠ、XhoⅠ쌍매절감정균증실TPM기인적중조성공,표체산물위32kD적융합단백,표체산물가피면역양성혈청식별.결론수차성공구건편마일본혈흡충린산병당전이매기인표체재체극륭,위진일보연구기작위역묘분자적가능성전정기출.
