血栓与止血学
血栓與止血學
혈전여지혈학
CHINESE JOURNAL OF THROMBOSIS AND HEMOSTASIS
2003年
3期
102-105
,共4页
王兆钺%赵小娟%施菊妹%韩悦%张威%白霞%陆定伟%阮长耿
王兆鉞%趙小娟%施菊妹%韓悅%張威%白霞%陸定偉%阮長耿
왕조월%조소연%시국매%한열%장위%백하%륙정위%원장경
巨大血小板综合征%血小板%糖蛋白%基因突变%转染
巨大血小闆綜閤徵%血小闆%糖蛋白%基因突變%轉染
거대혈소판종합정%혈소판%당단백%기인돌변%전염
目的:对1例有血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰb/Ⅸ缺失的巨大血小板综合征(BSS)患者的GPⅠb/Ⅸ的基因进行系统的研究.方法:用PCR扩增GPⅠ b α.GPⅠ bβ与GPⅨ基因全长编码序列并做DNA序列分析.用限制性内切酶HPYCH4Ⅲ对GPⅨ的基因片断做酶切位点分析.用定点诱变技术制备突变质粒并通过脂质体转染技术转染至中国仓鼠卵巢(CHO)细胞.用流式细胞术比较野生型与突变CHO细胞表面的GPⅠ b/Ⅸ表达.结果:在GPⅨcDNA的688 bp位置发现G→A突变,导致GPⅨ跨膜区139 Ala(GCC)被Thr(ACC)取代.该突变为一种国际上尚未报道的BSS新的基因突变.限制性酶切位点分析显示患者为纯合子,而家庭的其它成员为杂合子.野生型细胞表面有大量的GPⅠb/Ⅸ,但突变型细胞几乎无GPⅠb/Ⅸ表达.结论:研究表明本例BSS患者的发病机理为GP Ⅸ Ala139(GCC)→Thr(ACC)突变,并提出GPⅨ跨膜区结构对维持GPⅠb/Ⅸ在血小板正常表达与可能中的重要意义.
目的:對1例有血小闆膜糖蛋白(GP)Ⅰb/Ⅸ缺失的巨大血小闆綜閤徵(BSS)患者的GPⅠb/Ⅸ的基因進行繫統的研究.方法:用PCR擴增GPⅠ b α.GPⅠ bβ與GPⅨ基因全長編碼序列併做DNA序列分析.用限製性內切酶HPYCH4Ⅲ對GPⅨ的基因片斷做酶切位點分析.用定點誘變技術製備突變質粒併通過脂質體轉染技術轉染至中國倉鼠卵巢(CHO)細胞.用流式細胞術比較野生型與突變CHO細胞錶麵的GPⅠ b/Ⅸ錶達.結果:在GPⅨcDNA的688 bp位置髮現G→A突變,導緻GPⅨ跨膜區139 Ala(GCC)被Thr(ACC)取代.該突變為一種國際上尚未報道的BSS新的基因突變.限製性酶切位點分析顯示患者為純閤子,而傢庭的其它成員為雜閤子.野生型細胞錶麵有大量的GPⅠb/Ⅸ,但突變型細胞幾乎無GPⅠb/Ⅸ錶達.結論:研究錶明本例BSS患者的髮病機理為GP Ⅸ Ala139(GCC)→Thr(ACC)突變,併提齣GPⅨ跨膜區結構對維持GPⅠb/Ⅸ在血小闆正常錶達與可能中的重要意義.
목적:대1례유혈소판막당단백(GP)Ⅰb/Ⅸ결실적거대혈소판종합정(BSS)환자적GPⅠb/Ⅸ적기인진행계통적연구.방법:용PCR확증GPⅠ b α.GPⅠ bβ여GPⅨ기인전장편마서렬병주DNA서렬분석.용한제성내절매HPYCH4Ⅲ대GPⅨ적기인편단주매절위점분석.용정점유변기술제비돌변질립병통과지질체전염기술전염지중국창서란소(CHO)세포.용류식세포술비교야생형여돌변CHO세포표면적GPⅠ b/Ⅸ표체.결과:재GPⅨcDNA적688 bp위치발현G→A돌변,도치GPⅨ과막구139 Ala(GCC)피Thr(ACC)취대.해돌변위일충국제상상미보도적BSS신적기인돌변.한제성매절위점분석현시환자위순합자,이가정적기타성원위잡합자.야생형세포표면유대량적GPⅠb/Ⅸ,단돌변형세포궤호무GPⅠb/Ⅸ표체.결론:연구표명본례BSS환자적발병궤리위GP Ⅸ Ala139(GCC)→Thr(ACC)돌변,병제출GPⅨ과막구결구대유지GPⅠb/Ⅸ재혈소판정상표체여가능중적중요의의.
