科技通报
科技通報
과기통보
BULLETIN OF SCIENCE AND TECHNOLOGY
2002年
1期
18-23
,共6页
李植峰%高丽杰%施庆国%曹韫旭%孙树秦%陆德如
李植峰%高麗傑%施慶國%曹韞旭%孫樹秦%陸德如
리식봉%고려걸%시경국%조운욱%손수진%륙덕여
SV40早期启动子%荧光素酶基因%原核增强子
SV40早期啟動子%熒光素酶基因%原覈增彊子
SV40조기계동자%형광소매기인%원핵증강자
萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体pGL2可在原核细胞中高效表达.该载体中含有SV40 早期启动子及荧光素酶基因cDNA 5'端总长共758bp的DNA碱基序列,经计算机分析发现,在 SV40早期启动子中含有SV40基因组HindⅢB片断中一段长为49bp的DNA序列,且荧光素酶基因 cDNA编码区的5'端含有一个原核细胞基因表达调控区相似序列.将pGL2中的荧光素酶基因cDNA(Luc)克隆入真核表达载体pED中,构建成pED-Luc.该载体经表达测定后,只在真核细胞中表达,在原核细胞中不表达.这说明荧光素酶基因cDNA编码区的5'端的原核细胞基因表达调控区相似序列不具表达有活性的荧光素酶的功能.经DNA序列对比研究,认为pGL 2含有的SV40基因组HindⅢB片段5123bp～5171bp长49bp的DNA序列可能就是HindⅢB片段的原核增强子功能的决定序列.
螢火蟲熒光素酶基因cDNA真覈錶達載體pGL2可在原覈細胞中高效錶達.該載體中含有SV40 早期啟動子及熒光素酶基因cDNA 5'耑總長共758bp的DNA堿基序列,經計算機分析髮現,在 SV40早期啟動子中含有SV40基因組HindⅢB片斷中一段長為49bp的DNA序列,且熒光素酶基因 cDNA編碼區的5'耑含有一箇原覈細胞基因錶達調控區相似序列.將pGL2中的熒光素酶基因cDNA(Luc)剋隆入真覈錶達載體pED中,構建成pED-Luc.該載體經錶達測定後,隻在真覈細胞中錶達,在原覈細胞中不錶達.這說明熒光素酶基因cDNA編碼區的5'耑的原覈細胞基因錶達調控區相似序列不具錶達有活性的熒光素酶的功能.經DNA序列對比研究,認為pGL 2含有的SV40基因組HindⅢB片段5123bp～5171bp長49bp的DNA序列可能就是HindⅢB片段的原覈增彊子功能的決定序列.
형화충형광소매기인cDNA진핵표체재체pGL2가재원핵세포중고효표체.해재체중함유SV40 조기계동자급형광소매기인cDNA 5'단총장공758bp적DNA감기서렬,경계산궤분석발현,재 SV40조기계동자중함유SV40기인조HindⅢB편단중일단장위49bp적DNA서렬,차형광소매기인 cDNA편마구적5'단함유일개원핵세포기인표체조공구상사서렬.장pGL2중적형광소매기인cDNA(Luc)극륭입진핵표체재체pED중,구건성pED-Luc.해재체경표체측정후,지재진핵세포중표체,재원핵세포중불표체.저설명형광소매기인cDNA편마구적5'단적원핵세포기인표체조공구상사서렬불구표체유활성적형광소매적공능.경DNA서렬대비연구,인위pGL 2함유적SV40기인조HindⅢB편단5123bp～5171bp장49bp적DNA서렬가능취시HindⅢB편단적원핵증강자공능적결정서렬.
