生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2004年
3期
267-272
,共6页
陈宏%张添元%罗进贤%胡志上
陳宏%張添元%囉進賢%鬍誌上
진굉%장첨원%라진현%호지상
122～180片段%钙网蛋白%基因表达%内皮细胞%血管生成%肿瘤生长
122～180片段%鈣網蛋白%基因錶達%內皮細胞%血管生成%腫瘤生長
122～180편단%개망단백%기인표체%내피세포%혈관생성%종류생장
钙网蛋白是高等动物细胞中普遍存在的一种钙结合蛋白,近年发现它及其N端1～180位氨基酸能抑制内皮细胞生长和血管生成.为了寻找高效和小分子质量的血管生成抑制因子,用PCR技术扩增出钙网蛋白N端122～180位氨基酸的DNA序列,克隆进原核表达载体pET-3c,转化大肠杆菌BL21(DE3), 经IPTG诱导后,该片段以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的35.4%.包涵体经变性溶解、复性和初步纯化后,纯化产物可以抑制人脐静脉内皮细胞的生长,鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成和小鼠原位黑色素瘤的生长.
鈣網蛋白是高等動物細胞中普遍存在的一種鈣結閤蛋白,近年髮現它及其N耑1～180位氨基痠能抑製內皮細胞生長和血管生成.為瞭尋找高效和小分子質量的血管生成抑製因子,用PCR技術擴增齣鈣網蛋白N耑122～180位氨基痠的DNA序列,剋隆進原覈錶達載體pET-3c,轉化大腸桿菌BL21(DE3), 經IPTG誘導後,該片段以包涵體形式錶達,錶達量約佔菌體總蛋白的35.4%.包涵體經變性溶解、複性和初步純化後,純化產物可以抑製人臍靜脈內皮細胞的生長,鷄胚絨毛尿囊膜的血管生成和小鼠原位黑色素瘤的生長.
개망단백시고등동물세포중보편존재적일충개결합단백,근년발현타급기N단1～180위안기산능억제내피세포생장화혈관생성.위료심조고효화소분자질량적혈관생성억제인자,용PCR기술확증출개망단백N단122～180위안기산적DNA서렬,극륭진원핵표체재체pET-3c,전화대장간균BL21(DE3), 경IPTG유도후,해편단이포함체형식표체,표체량약점균체총단백적35.4%.포함체경변성용해、복성화초보순화후,순화산물가이억제인제정맥내피세포적생장,계배융모뇨낭막적혈관생성화소서원위흑색소류적생장.
