CAJ | 학술논문

目的:探讨幽门螺杆菌(Hp)oipA DNA重组质粒在防御Hp感染中的作用.方法:将Hp oipA基因的开放读码框架定向克隆入pVAX1载体,获得的重组子pVAX1-oipA转染SGC-7901细胞,用RT-PCR及ELISA方法检测细胞oipA转录及翻译水平的表达.抽提纯化重组质粒pVAX1-oipA,经肌肉注射免疫BALB/c小鼠(100μg/只)每周1次,共3次,以质粒pVAX1(空载组)和生理盐水(空白组)做对照,分别于末次注射1个月和2个月后ELISA法检测血清中相应抗体.在证实有免疫应答的基础上,以Hp SS1攻击小鼠(0.5×109 0.5 ml/只)3次,于末次攻击4周后,取胃黏膜组织作细菌学(包括胃黏膜快速尿素酶试验、细菌培养鉴定)和组织学检测.结果:pVAX1-oipA转染的SGC-7901细胞在转录水平和翻译水平均有相应的表达;免疫小鼠产生抗oipA抗体.免疫小鼠经细菌攻击后,实验组、空载组和空白组胃黏膜组织快速尿素酶实验阳性率分别为0(0/10)、90%(9/10)和100%(5/5),细菌培养阳性率分别为20%(2/10)、90%(9/10)和100%(5/5),组织学检测结果:空载组和空白组小鼠胃黏膜均出现轻度或重度糜烂,而实验组小鼠胃黏膜80%(8/10)正常,显示oipA DNA重组子具有免疫保护作用.结论:oipA DNA重组子能有效诱导抗Hp保护性免疫反应.
목적:탐토유문라간균(Hp)oipA DNA중조질립재방어Hp감염중적작용.방법:장Hp oipA기인적개방독마광가정향극륭입pVAX1재체,획득적중조자pVAX1-oipA전염SGC-7901세포,용RT-PCR급ELISA방법검측세포oipA전록급번역수평적표체.추제순화중조질립pVAX1-oipA,경기육주사면역BALB/c소서(100μg/지)매주1차,공3차,이질립pVAX1(공재조)화생리염수(공백조)주대조,분별우말차주사1개월화2개월후ELISA법검측혈청중상응항체.재증실유면역응답적기출상,이Hp SS1공격소서(0.5×109 0.5 ml/지)3차,우말차공격4주후,취위점막조직작세균학(포괄위점막쾌속뇨소매시험、세균배양감정)화조직학검측.결과:pVAX1-oipA전염적SGC-7901세포재전록수평화번역수평균유상응적표체;면역소서산생항oipA항체.면역소서경세균공격후,실험조、공재조화공백조위점막조직쾌속뇨소매실험양성솔분별위0(0/10)、90%(9/10)화100%(5/5),세균배양양성솔분별위20%(2/10)、90%(9/10)화100%(5/5),조직학검측결과:공재조화공백조소서위점막균출현경도혹중도미란,이실험조소서위점막80%(8/10)정상,현시oipA DNA중조자구유면역보호작용.결론:oipA DNA중조자능유효유도항Hp보호성면역반응.