江西农业学报
江西農業學報
강서농업학보
ACTA AGRICULTURAE JIANGXI
2008年
5期
21-24
,共4页
郭琼霞%黄可辉%庄蓉%黄振%虞赟%沈建国
郭瓊霞%黃可輝%莊蓉%黃振%虞赟%瀋建國
곽경하%황가휘%장용%황진%우빈%침건국
菟丝子%RAPD%反应体系%优化
菟絲子%RAPD%反應體繫%優化
토사자%RAPD%반응체계%우화
以南方菟丝子基因组DNA为试材,采用单因素递进筛选方法对菟丝子的RAPD反应体系进行了优化.结果表明,在25μL总反应体积中,最佳浓度配比为:模板DNA 20ng, MgCl2 3.0mmoL/L,引物10μmoL/L, dNTP 400μmoL/L, Taq DNA聚合酶1个单位(U),10×反应缓冲液2.5μL.扩增程序为:94℃变性3min,再进入循环;94℃变性1min, 40℃退火1min,72℃延伸1min,共40个循环;72℃最终延伸10min,于4℃保存.
以南方菟絲子基因組DNA為試材,採用單因素遞進篩選方法對菟絲子的RAPD反應體繫進行瞭優化.結果錶明,在25μL總反應體積中,最佳濃度配比為:模闆DNA 20ng, MgCl2 3.0mmoL/L,引物10μmoL/L, dNTP 400μmoL/L, Taq DNA聚閤酶1箇單位(U),10×反應緩遲液2.5μL.擴增程序為:94℃變性3min,再進入循環;94℃變性1min, 40℃退火1min,72℃延伸1min,共40箇循環;72℃最終延伸10min,于4℃保存.
이남방토사자기인조DNA위시재,채용단인소체진사선방법대토사자적RAPD반응체계진행료우화.결과표명,재25μL총반응체적중,최가농도배비위:모판DNA 20ng, MgCl2 3.0mmoL/L,인물10μmoL/L, dNTP 400μmoL/L, Taq DNA취합매1개단위(U),10×반응완충액2.5μL.확증정서위:94℃변성3min,재진입순배;94℃변성1min, 40℃퇴화1min,72℃연신1min,공40개순배;72℃최종연신10min,우4℃보존.
