现代生物医学进展
現代生物醫學進展
현대생물의학진전
PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE
2008年
5期
825-827,封3
,共4页
张琼%谭逵%蒋立平%谢荣华%范久波%舒衡平%吴翔
張瓊%譚逵%蔣立平%謝榮華%範久波%舒衡平%吳翔
장경%담규%장립평%사영화%범구파%서형평%오상
刚地弓形虫%MIC3%GFP表达载体%表达定位
剛地弓形蟲%MIC3%GFP錶達載體%錶達定位
강지궁형충%MIC3%GFP표체재체%표체정위
目的:构建以绿色荧光蛋白(greenfluoreseeneeprotein,GFP)为报告基因的重组表达质粒pEGFP-C2-MIC3并检测MIC3-EGFP融合蛋白其在COS-7细胞中的表达及定位.方法:通过基因重组的方法构建pEGFP-C2-MIC3重组真核表达质粒,并通过酶切和基因测序鉴定.脂质体法转染体外培养的COS-7细胞,转染后24h在活细胞状态下用倒置荧光显微镜直接观察MIC3-EGFP融合蛋白在COS-7细胞中的分布.结果:PCR检测,酶切鉴定及测序证实目的基因MIC3正确连接到pEGFP-C2的多克隆位点.pEGFP-C2-MIC3重组体转染COS-7后,在细胞质表达.结论:成功地构建了pEGFP-C2-MIC3融合蛋白真核表达质粒,在COS-7细胞中获得表达.
目的:構建以綠色熒光蛋白(greenfluoreseeneeprotein,GFP)為報告基因的重組錶達質粒pEGFP-C2-MIC3併檢測MIC3-EGFP融閤蛋白其在COS-7細胞中的錶達及定位.方法:通過基因重組的方法構建pEGFP-C2-MIC3重組真覈錶達質粒,併通過酶切和基因測序鑒定.脂質體法轉染體外培養的COS-7細胞,轉染後24h在活細胞狀態下用倒置熒光顯微鏡直接觀察MIC3-EGFP融閤蛋白在COS-7細胞中的分佈.結果:PCR檢測,酶切鑒定及測序證實目的基因MIC3正確連接到pEGFP-C2的多剋隆位點.pEGFP-C2-MIC3重組體轉染COS-7後,在細胞質錶達.結論:成功地構建瞭pEGFP-C2-MIC3融閤蛋白真覈錶達質粒,在COS-7細胞中穫得錶達.
목적:구건이록색형광단백(greenfluoreseeneeprotein,GFP)위보고기인적중조표체질립pEGFP-C2-MIC3병검측MIC3-EGFP융합단백기재COS-7세포중적표체급정위.방법:통과기인중조적방법구건pEGFP-C2-MIC3중조진핵표체질립,병통과매절화기인측서감정.지질체법전염체외배양적COS-7세포,전염후24h재활세포상태하용도치형광현미경직접관찰MIC3-EGFP융합단백재COS-7세포중적분포.결과:PCR검측,매절감정급측서증실목적기인MIC3정학련접도pEGFP-C2적다극륭위점.pEGFP-C2-MIC3중조체전염COS-7후,재세포질표체.결론:성공지구건료pEGFP-C2-MIC3융합단백진핵표체질립,재COS-7세포중획득표체.
