第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2008年
8期
934-939
,共6页
吕立权%楼美清%董艳%蔡如珏%胡国汉%骆纯%侯立军%卢亦成
呂立權%樓美清%董豔%蔡如玨%鬍國漢%駱純%侯立軍%盧亦成
려립권%루미청%동염%채여각%호국한%락순%후립군%로역성
慢性视神经损伤%cDNA文库%基因表达
慢性視神經損傷%cDNA文庫%基因錶達
만성시신경손상%cDNA문고%기인표체
目的:对构建的猫视神经慢性损伤相关差异表达cDNA文库进行初步克隆、鉴定和分析.方法:用氯化钙转化法转化大肠杆菌进行cDNA文库扩增和蓝白斑筛选,每个文库随机挑取300个白色克隆用菌落PCR进行鉴定.对阳性克隆菌落进行DNA测序以获得差异表达基因片段序列.将测序所得的序列通过互联网用Blast程序查找日本国家DNA数据库进行同源性分析.用实时定量PCR验证差异克隆.结果:PCR鉴定获得1000个阳性菌落,测序获得674个EST片段,序列长度在200～800 bp之间.同源性分析结果提示4周正向文库得到14个同源基因,4周反向文库得到20个同源基因,8周正向文库得到23个同源基因,8周反向文库得到19个同源基因.这些基因可归类于能量代谢、物质转运、信号转导、基因转录、细胞损伤与修复、MHC分子等.实时定量PCR检测的4个克隆证实是差异表达序列.结论:本研究构建的视神经慢性损伤相关差异表达cDNA文库为进一步鉴定和研究慢性视神经损伤相关基因提供了实验基础.
目的:對構建的貓視神經慢性損傷相關差異錶達cDNA文庫進行初步剋隆、鑒定和分析.方法:用氯化鈣轉化法轉化大腸桿菌進行cDNA文庫擴增和藍白斑篩選,每箇文庫隨機挑取300箇白色剋隆用菌落PCR進行鑒定.對暘性剋隆菌落進行DNA測序以穫得差異錶達基因片段序列.將測序所得的序列通過互聯網用Blast程序查找日本國傢DNA數據庫進行同源性分析.用實時定量PCR驗證差異剋隆.結果:PCR鑒定穫得1000箇暘性菌落,測序穫得674箇EST片段,序列長度在200～800 bp之間.同源性分析結果提示4週正嚮文庫得到14箇同源基因,4週反嚮文庫得到20箇同源基因,8週正嚮文庫得到23箇同源基因,8週反嚮文庫得到19箇同源基因.這些基因可歸類于能量代謝、物質轉運、信號轉導、基因轉錄、細胞損傷與脩複、MHC分子等.實時定量PCR檢測的4箇剋隆證實是差異錶達序列.結論:本研究構建的視神經慢性損傷相關差異錶達cDNA文庫為進一步鑒定和研究慢性視神經損傷相關基因提供瞭實驗基礎.
목적:대구건적묘시신경만성손상상관차이표체cDNA문고진행초보극륭、감정화분석.방법:용록화개전화법전화대장간균진행cDNA문고확증화람백반사선,매개문고수궤도취300개백색극륭용균락PCR진행감정.대양성극륭균락진행DNA측서이획득차이표체기인편단서렬.장측서소득적서렬통과호련망용Blast정서사조일본국가DNA수거고진행동원성분석.용실시정량PCR험증차이극륭.결과:PCR감정획득1000개양성균락,측서획득674개EST편단,서렬장도재200～800 bp지간.동원성분석결과제시4주정향문고득도14개동원기인,4주반향문고득도20개동원기인,8주정향문고득도23개동원기인,8주반향문고득도19개동원기인.저사기인가귀류우능량대사、물질전운、신호전도、기인전록、세포손상여수복、MHC분자등.실시정량PCR검측적4개극륭증실시차이표체서렬.결론:본연구구건적시신경만성손상상관차이표체cDNA문고위진일보감정화연구만성시신경손상상관기인제공료실험기출.
