中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
40期
7425-7429
,共5页
孙客%王国兵%祖莹%唐盛平%于薇%陈小文
孫客%王國兵%祖瑩%唐盛平%于薇%陳小文
손객%왕국병%조형%당성평%우미%진소문
骨髓间充质干细胞%儿童%自体血清%成骨分化%细胞培养
骨髓間充質榦細胞%兒童%自體血清%成骨分化%細胞培養
골수간충질간세포%인동%자체혈청%성골분화%세포배양
背景: 目前成人骨髓间充质干细胞体外培养成骨定向分化的研究较多,甚少见有不同年龄儿童骨髓间充质干细胞自体血清体外培养及成骨定向分化生物学特性差异的报道.目的: 研究不同年龄儿童骨髓间充质干细胞的自体血清体外培养条件与方法,并探讨其成骨诱导分化后的基本生物学特性.方法: 无菌条件下收集3个不同年龄组儿童骨髓悬液,分离人骨髓间充质干细胞,采用含自体血清的培养基培养;测定细胞生长曲线,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原;取传代培养细胞,经β-甘油磷酸钠、抗坏血酸及地塞米松进行成骨诱导分化后,采用免疫组织化学法检测碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原以及钙结节形成,以评价其分化效率;倒置相差显微镜逐日观察原代、传代及诱导分化细胞的生长情况及形态学改变.结果与结论: 3组儿童培养的人骨髓间充质干细胞,经刺激培养后细胞表面抗原CD29、CD44为阳性,CD34、CD45、CD105、CD106及HLA-DR均为阴性,各组表达强度差异无显著性意义.不同年龄组儿童人骨髓间充质干细胞生长速度以及分化效率随年龄增大而减小.结果提示通过对不同年龄组儿童人骨髓间充质干细胞生长特性、表面抗原表达以及分化潜能等方面的对比研究,自体血清可作为安全有效的培养方法,且年龄越小,分化效率相对越高.
揹景: 目前成人骨髓間充質榦細胞體外培養成骨定嚮分化的研究較多,甚少見有不同年齡兒童骨髓間充質榦細胞自體血清體外培養及成骨定嚮分化生物學特性差異的報道.目的: 研究不同年齡兒童骨髓間充質榦細胞的自體血清體外培養條件與方法,併探討其成骨誘導分化後的基本生物學特性.方法: 無菌條件下收集3箇不同年齡組兒童骨髓懸液,分離人骨髓間充質榦細胞,採用含自體血清的培養基培養;測定細胞生長麯線,採用流式細胞儀檢測細胞錶麵抗原;取傳代培養細胞,經β-甘油燐痠鈉、抗壞血痠及地塞米鬆進行成骨誘導分化後,採用免疫組織化學法檢測堿性燐痠酶、Ⅰ型膠原以及鈣結節形成,以評價其分化效率;倒置相差顯微鏡逐日觀察原代、傳代及誘導分化細胞的生長情況及形態學改變.結果與結論: 3組兒童培養的人骨髓間充質榦細胞,經刺激培養後細胞錶麵抗原CD29、CD44為暘性,CD34、CD45、CD105、CD106及HLA-DR均為陰性,各組錶達彊度差異無顯著性意義.不同年齡組兒童人骨髓間充質榦細胞生長速度以及分化效率隨年齡增大而減小.結果提示通過對不同年齡組兒童人骨髓間充質榦細胞生長特性、錶麵抗原錶達以及分化潛能等方麵的對比研究,自體血清可作為安全有效的培養方法,且年齡越小,分化效率相對越高.
배경: 목전성인골수간충질간세포체외배양성골정향분화적연구교다,심소견유불동년령인동골수간충질간세포자체혈청체외배양급성골정향분화생물학특성차이적보도.목적: 연구불동년령인동골수간충질간세포적자체혈청체외배양조건여방법,병탐토기성골유도분화후적기본생물학특성.방법: 무균조건하수집3개불동년령조인동골수현액,분리인골수간충질간세포,채용함자체혈청적배양기배양;측정세포생장곡선,채용류식세포의검측세포표면항원;취전대배양세포,경β-감유린산납、항배혈산급지새미송진행성골유도분화후,채용면역조직화학법검측감성린산매、Ⅰ형효원이급개결절형성,이평개기분화효솔;도치상차현미경축일관찰원대、전대급유도분화세포적생장정황급형태학개변.결과여결론: 3조인동배양적인골수간충질간세포,경자격배양후세포표면항원CD29、CD44위양성,CD34、CD45、CD105、CD106급HLA-DR균위음성,각조표체강도차이무현저성의의.불동년령조인동인골수간충질간세포생장속도이급분화효솔수년령증대이감소.결과제시통과대불동년령조인동인골수간충질간세포생장특성、표면항원표체이급분화잠능등방면적대비연구,자체혈청가작위안전유효적배양방법,차년령월소,분화효솔상대월고.