实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2011年
4期
558-561
,共4页
李治熹%邓小耿%张杰%周嘉嘉%伍耀豪%谢平%邱荣林
李治熹%鄧小耿%張傑%週嘉嘉%伍耀豪%謝平%邱榮林
리치희%산소경%장걸%주가가%오요호%사평%구영림
胚胎干细胞%肝细胞移植%诱导分化%淤胆血清
胚胎榦細胞%肝細胞移植%誘導分化%淤膽血清
배태간세포%간세포이식%유도분화%어담혈청
目的:探讨淤胆血清"病理微环境" 培养体系诱导胚胎干细胞(ESC)向肝细胞分化的效果及对肝干细胞的筛选作用.方法:将小鼠ESC细胞系E14在无白血病抑制因子培养基中培养,使其自发分化为拟胚体,加入FGF-4和HGF初步诱导,然后置于5%淤胆鼠血清"病理微环境"筛选培养液中继续培养2周,然后进行细胞形态学观察,ALB和CK8/18免疫荧光染色,电镜检查和吲哚氰绿(ICG)摄取试验.结果:经初步诱导分化的ESC置于5%淤胆血清"病理微环境"筛选培养液中培养,初期细胞生长受抑制,部分细胞坏死、凋亡并脱落.1周左右可见上皮样细胞集落呈优势生长.2周左右可见较多肝细胞样集落形成单位(H-CFU),大部分细胞分化为多角形的肝细胞样细胞,呈现较好的均质性,从中央到周边呈逐渐分化成熟的趋势;免疫荧光染色显示ALB和CK8/18表达;电镜检查可见与肝细胞相似的超微结构;吲哚氰绿(ICG)摄取试验可见大量ICG阳性细胞,提示这些细胞具备部分肝细胞特性,且筛选诱导组ICG阳性率显著高于对照组(P ＜ 0.05).结论:采用含淤胆血清的"病理微环境"培养体系从经FGF-4和HGF初步诱导的胚胎干细胞中有效筛选出了具有功能的肝细胞样细胞.
目的:探討淤膽血清"病理微環境" 培養體繫誘導胚胎榦細胞(ESC)嚮肝細胞分化的效果及對肝榦細胞的篩選作用.方法:將小鼠ESC細胞繫E14在無白血病抑製因子培養基中培養,使其自髮分化為擬胚體,加入FGF-4和HGF初步誘導,然後置于5%淤膽鼠血清"病理微環境"篩選培養液中繼續培養2週,然後進行細胞形態學觀察,ALB和CK8/18免疫熒光染色,電鏡檢查和吲哚氰綠(ICG)攝取試驗.結果:經初步誘導分化的ESC置于5%淤膽血清"病理微環境"篩選培養液中培養,初期細胞生長受抑製,部分細胞壞死、凋亡併脫落.1週左右可見上皮樣細胞集落呈優勢生長.2週左右可見較多肝細胞樣集落形成單位(H-CFU),大部分細胞分化為多角形的肝細胞樣細胞,呈現較好的均質性,從中央到週邊呈逐漸分化成熟的趨勢;免疫熒光染色顯示ALB和CK8/18錶達;電鏡檢查可見與肝細胞相似的超微結構;吲哚氰綠(ICG)攝取試驗可見大量ICG暘性細胞,提示這些細胞具備部分肝細胞特性,且篩選誘導組ICG暘性率顯著高于對照組(P ＜ 0.05).結論:採用含淤膽血清的"病理微環境"培養體繫從經FGF-4和HGF初步誘導的胚胎榦細胞中有效篩選齣瞭具有功能的肝細胞樣細胞.
목적:탐토어담혈청"병리미배경" 배양체계유도배태간세포(ESC)향간세포분화적효과급대간간세포적사선작용.방법:장소서ESC세포계E14재무백혈병억제인자배양기중배양,사기자발분화위의배체,가입FGF-4화HGF초보유도,연후치우5%어담서혈청"병리미배경"사선배양액중계속배양2주,연후진행세포형태학관찰,ALB화CK8/18면역형광염색,전경검사화신타청록(ICG)섭취시험.결과:경초보유도분화적ESC치우5%어담혈청"병리미배경"사선배양액중배양,초기세포생장수억제,부분세포배사、조망병탈락.1주좌우가견상피양세포집락정우세생장.2주좌우가견교다간세포양집락형성단위(H-CFU),대부분세포분화위다각형적간세포양세포,정현교호적균질성,종중앙도주변정축점분화성숙적추세;면역형광염색현시ALB화CK8/18표체;전경검사가견여간세포상사적초미결구;신타청록(ICG)섭취시험가견대량ICG양성세포,제시저사세포구비부분간세포특성,차사선유도조ICG양성솔현저고우대조조(P ＜ 0.05).결론:채용함어담혈청적"병리미배경"배양체계종경FGF-4화HGF초보유도적배태간세포중유효사선출료구유공능적간세포양세포.
