生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
6期
71-75
,共5页
方袁梦梦%崔润泽%陈访访%周嘉裕%廖海
方袁夢夢%崔潤澤%陳訪訪%週嘉裕%廖海
방원몽몽%최윤택%진방방%주가유%료해
决明%查尔酮合成酶%克隆%原核表达载体%构建
決明%查爾酮閤成酶%剋隆%原覈錶達載體%構建
결명%사이동합성매%극륭%원핵표체재체%구건
从决明子叶中提取查尔酮合成酶(Chalcone synthase)总RNA,经过RT-PCR获得查尔酮合成酶cDNA,纯化后与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌Top10,获得了查尔酮合成酶全长基因序列.序列测定表明,查尔酮合成酶全长核苷酸长度为1 173 bp,编码390个氨基酸.与GenBank中已发表序列EU430077进行比较,核苷酸同源性为100%.将该基因片段克隆到原核表达栽体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)/Chalcone synthase,所获重组质粒经过双酶切、PCR和序列测定,证实含有目的片段,且连接、构建正确,为查尔酮合成酶的进一步表达奠定了基础.
從決明子葉中提取查爾酮閤成酶(Chalcone synthase)總RNA,經過RT-PCR穫得查爾酮閤成酶cDNA,純化後與pMD18-T載體連接,轉化大腸桿菌Top10,穫得瞭查爾酮閤成酶全長基因序列.序列測定錶明,查爾酮閤成酶全長覈苷痠長度為1 173 bp,編碼390箇氨基痠.與GenBank中已髮錶序列EU430077進行比較,覈苷痠同源性為100%.將該基因片段剋隆到原覈錶達栽體pET-28a(+)中,構建重組質粒pET-28a(+)/Chalcone synthase,所穫重組質粒經過雙酶切、PCR和序列測定,證實含有目的片段,且連接、構建正確,為查爾酮閤成酶的進一步錶達奠定瞭基礎.
종결명자협중제취사이동합성매(Chalcone synthase)총RNA,경과RT-PCR획득사이동합성매cDNA,순화후여pMD18-T재체련접,전화대장간균Top10,획득료사이동합성매전장기인서렬.서렬측정표명,사이동합성매전장핵감산장도위1 173 bp,편마390개안기산.여GenBank중이발표서렬EU430077진행비교,핵감산동원성위100%.장해기인편단극륭도원핵표체재체pET-28a(+)중,구건중조질립pET-28a(+)/Chalcone synthase,소획중조질립경과쌍매절、PCR화서렬측정,증실함유목적편단,차련접、구건정학,위사이동합성매적진일보표체전정료기출.
