中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
12期
936-939
,共4页
任保彦%付成福%宫鹏涛%韩乾忠%杨举%李赫%张国才%张西臣%李建华
任保彥%付成福%宮鵬濤%韓乾忠%楊舉%李赫%張國纔%張西臣%李建華
임보언%부성복%궁붕도%한건충%양거%리혁%장국재%장서신%리건화
斯氏艾美尔球虫%ADF基因%真核表达
斯氏艾美爾毬蟲%ADF基因%真覈錶達
사씨애미이구충%ADF기인%진핵표체
为真核表达斯氏艾美尔球虫(Eimeria stiedae)肌动蛋白解聚因子(ADF)基因,本研究采用RT-PCR技术扩增ADF基因,构建pVAX- 1-ADF真核重组质粒,并转染HeLa细胞.采用RT-PCR方法检测ADF mRNA转录水平、western blot检测ADF蛋白表达水平.琼脂糖凝胶电泳结果表明PCR扩增出一条大小为350 bp的特异性片段,与预期值相符.Western blot检测显示,转染pVAX- 1-ADF的HeLa细胞在大约13ku处出现特异性表达条带,与预期值相符.本研究构建了E.stiedae ADF基因真核表达质粒pVAX- 1-ADF,并且在体外真核细胞中表达,为进一步寻找防治E.stiedae的疫苗候选基因奠定了基础.
為真覈錶達斯氏艾美爾毬蟲(Eimeria stiedae)肌動蛋白解聚因子(ADF)基因,本研究採用RT-PCR技術擴增ADF基因,構建pVAX- 1-ADF真覈重組質粒,併轉染HeLa細胞.採用RT-PCR方法檢測ADF mRNA轉錄水平、western blot檢測ADF蛋白錶達水平.瓊脂糖凝膠電泳結果錶明PCR擴增齣一條大小為350 bp的特異性片段,與預期值相符.Western blot檢測顯示,轉染pVAX- 1-ADF的HeLa細胞在大約13ku處齣現特異性錶達條帶,與預期值相符.本研究構建瞭E.stiedae ADF基因真覈錶達質粒pVAX- 1-ADF,併且在體外真覈細胞中錶達,為進一步尋找防治E.stiedae的疫苗候選基因奠定瞭基礎.
위진핵표체사씨애미이구충(Eimeria stiedae)기동단백해취인자(ADF)기인,본연구채용RT-PCR기술확증ADF기인,구건pVAX- 1-ADF진핵중조질립,병전염HeLa세포.채용RT-PCR방법검측ADF mRNA전록수평、western blot검측ADF단백표체수평.경지당응효전영결과표명PCR확증출일조대소위350 bp적특이성편단,여예기치상부.Western blot검측현시,전염pVAX- 1-ADF적HeLa세포재대약13ku처출현특이성표체조대,여예기치상부.본연구구건료E.stiedae ADF기인진핵표체질립pVAX- 1-ADF,병차재체외진핵세포중표체,위진일보심조방치E.stiedae적역묘후선기인전정료기출.
