温州医学院学报
溫州醫學院學報
온주의학원학보
JOURNAL OF WENZHOU MEDICAL COLLEGE
2012年
2期
124-128
,共5页
旷文安%黄伟聪%王珏%杨凯%郑哲%孙成超
曠文安%黃偉聰%王玨%楊凱%鄭哲%孫成超
광문안%황위총%왕각%양개%정철%손성초
心肌细胞%细胞周期%磷酸化组蛋白3%细胞增殖%有丝分裂指数%大鼠
心肌細胞%細胞週期%燐痠化組蛋白3%細胞增殖%有絲分裂指數%大鼠
심기세포%세포주기%린산화조단백3%세포증식%유사분렬지수%대서
目的:通过对大鼠出生后早期不同时间点心肌细胞有丝分裂指数和细胞周期进程相关基因表达水平的定量检测,确定大鼠出生后心肌细胞丧失分裂增殖能力的时间,为心肌细胞增殖研究奠定细胞学及形态学基础.方法:用qRT-PCR法检测出生后第1、4、7、10、14天,共5个不同时间点SD大鼠心肌细胞中细胞周期进程相关基因的mRNA表达水平.肌钙蛋白T(cTnt)和磷酸化组蛋白3(H3p)单克隆抗体对上述5个时间点的心室肌组织进行双重免疫荧光染色,同时用DAPI显示细胞核,荧光显微镜观察并拍照.结果:①大鼠出生后早期不同时间点心肌细胞有丝分裂指数差异有统计学意义(P<0.05),生后第4天有丝分裂指数达到峰值.②心肌细胞周期进程相关基因Ccnd1、Ccna2、Ccnb1、Cdk1、CDk2和Cdk4的表达在生后第4天出现高峰,之后呈递减趋势;但是Cdk蛋白抑制基因Cdkn1a、Cdkn1b的表达一直呈递增趋势.结论:①大鼠出生后第10天心肌细胞逐渐丧失分裂增殖能力;②细胞周期相关基因的表达和有丝分裂指数在出生后第4天出现峰值可能与心肌细胞的多核化和肥大性生长有关.
目的:通過對大鼠齣生後早期不同時間點心肌細胞有絲分裂指數和細胞週期進程相關基因錶達水平的定量檢測,確定大鼠齣生後心肌細胞喪失分裂增殖能力的時間,為心肌細胞增殖研究奠定細胞學及形態學基礎.方法:用qRT-PCR法檢測齣生後第1、4、7、10、14天,共5箇不同時間點SD大鼠心肌細胞中細胞週期進程相關基因的mRNA錶達水平.肌鈣蛋白T(cTnt)和燐痠化組蛋白3(H3p)單剋隆抗體對上述5箇時間點的心室肌組織進行雙重免疫熒光染色,同時用DAPI顯示細胞覈,熒光顯微鏡觀察併拍照.結果:①大鼠齣生後早期不同時間點心肌細胞有絲分裂指數差異有統計學意義(P<0.05),生後第4天有絲分裂指數達到峰值.②心肌細胞週期進程相關基因Ccnd1、Ccna2、Ccnb1、Cdk1、CDk2和Cdk4的錶達在生後第4天齣現高峰,之後呈遞減趨勢;但是Cdk蛋白抑製基因Cdkn1a、Cdkn1b的錶達一直呈遞增趨勢.結論:①大鼠齣生後第10天心肌細胞逐漸喪失分裂增殖能力;②細胞週期相關基因的錶達和有絲分裂指數在齣生後第4天齣現峰值可能與心肌細胞的多覈化和肥大性生長有關.
목적:통과대대서출생후조기불동시간점심기세포유사분렬지수화세포주기진정상관기인표체수평적정량검측,학정대서출생후심기세포상실분렬증식능력적시간,위심기세포증식연구전정세포학급형태학기출.방법:용qRT-PCR법검측출생후제1、4、7、10、14천,공5개불동시간점SD대서심기세포중세포주기진정상관기인적mRNA표체수평.기개단백T(cTnt)화린산화조단백3(H3p)단극륭항체대상술5개시간점적심실기조직진행쌍중면역형광염색,동시용DAPI현시세포핵,형광현미경관찰병박조.결과:①대서출생후조기불동시간점심기세포유사분렬지수차이유통계학의의(P<0.05),생후제4천유사분렬지수체도봉치.②심기세포주기진정상관기인Ccnd1、Ccna2、Ccnb1、Cdk1、CDk2화Cdk4적표체재생후제4천출현고봉,지후정체감추세;단시Cdk단백억제기인Cdkn1a、Cdkn1b적표체일직정체증추세.결론:①대서출생후제10천심기세포축점상실분렬증식능력;②세포주기상관기인적표체화유사분렬지수재출생후제4천출현봉치가능여심기세포적다핵화화비대성생장유관.