海南大学学报(自然科学版)
海南大學學報(自然科學版)
해남대학학보(자연과학판)
NATURAL SCIENCE JOURNAL OF HAINAN UNIVERSITY
2004年
1期
61-69
,共9页
AcMNPV%BmNPV%polh启动子%增强序列
AcMNPV%BmNPV%polh啟動子%增彊序列
AcMNPV%BmNPV%polh계동자%증강서렬
本实验构建了2个用于杆状病毒AcMNPV(苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒)启动子及其调控序列研究的质粒载体:pF-SBCAT和pF-SBCATP polh.以此为基础,结合目前对BmNPV(家蚕核多角体病毒)polh(多角体)基因和AcMNPV polh基因上游增强序列的研究结果,构建了AcMNPV polh基因上游增强序列部分缺失的瞬时表达载体;以cat为报告基因,利用瞬时转染和CAT ELISA的方法检测报告基因的表达活性,初步研究了对于polh启动子具有增强作用的AcMNPV polh基因上游序列的结构.结果显示,与BmNPV polh上游293bp序列同源性极高的AcMNPV polh上游293bp片段对于polh启动子没有增强活性;CMVm启动子的AcMNPV polh上游增强序列部分缺失之后不能够增强AcMNPV polh启动子.因此,这一序列可能不再被缩短,也不大可能存在独立地起作用和更短的正、负调控元件.
本實驗構建瞭2箇用于桿狀病毒AcMNPV(苜蓿丫紋夜蛾覈多角體病毒)啟動子及其調控序列研究的質粒載體:pF-SBCAT和pF-SBCATP polh.以此為基礎,結閤目前對BmNPV(傢蠶覈多角體病毒)polh(多角體)基因和AcMNPV polh基因上遊增彊序列的研究結果,構建瞭AcMNPV polh基因上遊增彊序列部分缺失的瞬時錶達載體;以cat為報告基因,利用瞬時轉染和CAT ELISA的方法檢測報告基因的錶達活性,初步研究瞭對于polh啟動子具有增彊作用的AcMNPV polh基因上遊序列的結構.結果顯示,與BmNPV polh上遊293bp序列同源性極高的AcMNPV polh上遊293bp片段對于polh啟動子沒有增彊活性;CMVm啟動子的AcMNPV polh上遊增彊序列部分缺失之後不能夠增彊AcMNPV polh啟動子.因此,這一序列可能不再被縮短,也不大可能存在獨立地起作用和更短的正、負調控元件.
본실험구건료2개용우간상병독AcMNPV(목숙아문야아핵다각체병독)계동자급기조공서렬연구적질립재체:pF-SBCAT화pF-SBCATP polh.이차위기출,결합목전대BmNPV(가잠핵다각체병독)polh(다각체)기인화AcMNPV polh기인상유증강서렬적연구결과,구건료AcMNPV polh기인상유증강서렬부분결실적순시표체재체;이cat위보고기인,이용순시전염화CAT ELISA적방법검측보고기인적표체활성,초보연구료대우polh계동자구유증강작용적AcMNPV polh기인상유서렬적결구.결과현시,여BmNPV polh상유293bp서렬동원성겁고적AcMNPV polh상유293bp편단대우polh계동자몰유증강활성;CMVm계동자적AcMNPV polh상유증강서렬부분결실지후불능구증강AcMNPV polh계동자.인차,저일서렬가능불재피축단,야불대가능존재독입지기작용화경단적정、부조공원건.
