CAJ | 학술논문

目的:利用精密肝切片(PCLS)技术,建立醋氨酚所致肝切片损伤的体外模型,并探讨CYP2E1活性变化对肝损伤的调节作用,为研究和筛选肝保护药物提供实验依据.方法:利用振荡切片机制备PCLS,建立培养系统.将终浓度为 500 μmol/L 的醋氨酚分别与切片共孵育0、2、4、6 h,测定培养基和切片中的谷胱甘肽S-转移酶(GST)和乳酸脱氢酶(LDH)活性.在体给予不同剂量(0.25、0.5、1.0 g/kg)的CYP2E1诱导剂乙醇,每天一次,连续 3 d.末次给药 8 h 后处死动物,取其肝脏制备PCLS,再与 500 μmol/L 醋氨酚共同孵育 6 h,检测ALT和LDH漏出率.正常PCLS与不同浓度的二乙基二硫代氨基甲酸酯盐(DDTC,CYP2E1抑制剂)(5、10、20 μmol/L)、500 μmol/L 醋氨酚共同孵育 6 h,检测ALT和LDH漏出率.结果:与常规培养组比较,醋氨酚孵育4、6 h 组的GST和LDH漏出率显著升高(P＜0.01).与醋氨酚模型对照组比较,乙醇中、大剂量组LDH漏出率和小、大剂量组ALT漏出率皆升高(P<0.01,P<0.05);DDTC各浓度组ALT漏出率则降低(P<0.05).结论:PCLS与 500 μmol/L 醋氨酚共孵育 4 h 即能成功地建立体外肝切片损伤的模型.抑制CYP2E1活性可能对醋氨酚所致的肝损伤有保护作用,而上调CYP2E1活性则可能加重醋氨酚所致的肝损伤.
목적:이용정밀간절편(PCLS)기술,건립작안분소치간절편손상적체외모형,병탐토CYP2E1활성변화대간손상적조절작용,위연구화사선간보호약물제공실험의거.방법:이용진탕절편궤제비PCLS,건립배양계통.장종농도위 500 μmol/L 적작안분분별여절편공부육0、2、4、6 h,측정배양기화절편중적곡광감태S-전이매(GST)화유산탈경매(LDH)활성.재체급여불동제량(0.25、0.5、1.0 g/kg)적CYP2E1유도제을순,매천일차,련속 3 d.말차급약 8 h 후처사동물,취기간장제비PCLS,재여 500 μmol/L 작안분공동부육 6 h,검측ALT화LDH루출솔.정상PCLS여불동농도적이을기이류대안기갑산지염(DDTC,CYP2E1억제제)(5、10、20 μmol/L)、500 μmol/L 작안분공동부육 6 h,검측ALT화LDH루출솔.결과:여상규배양조비교,작안분부육4、6 h 조적GST화LDH루출솔현저승고(P＜0.01).여작안분모형대조조비교,을순중、대제량조LDH루출솔화소、대제량조ALT루출솔개승고(P<0.01,P<0.05);DDTC각농도조ALT루출솔칙강저(P<0.05).결론:PCLS여 500 μmol/L 작안분공부육 4 h 즉능성공지건입체외간절편손상적모형.억제CYP2E1활성가능대작안분소치적간손상유보호작용,이상조CYP2E1활성칙가능가중작안분소치적간손상.