重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2009年
9期
1053-1055
,共3页
陈锐%刘友生%朱江%段光杰%葛晓冬
陳銳%劉友生%硃江%段光傑%葛曉鼕
진예%류우생%주강%단광걸%갈효동
核糖体展示%文库%天然人源单链Fv(scFv)抗体
覈糖體展示%文庫%天然人源單鏈Fv(scFv)抗體
핵당체전시%문고%천연인원단련Fv(scFv)항체
目的 构建大容量天然人源核糖体展示单链抗体(single chain Fv,scFv)文库,为抗体研究提供方便有效的技术平台.方法 收集健康献血志愿者的白细胞悬液,离心分离单个核细胞,抽提其总RNA,逆转录成cDNA、PCR及重叠延伸PCR法构建scFv文库,并通过第2次重叠延伸PCR在scFv DNA序列5'端添加T7启动子、茎环结构、核糖体结合位点,其3'端添加6×His标签、间隔序列(基因Ⅲ)、茎环结构等改造成核糖体展示天然人源scFv文库.结果 成功构建了可用于筛选抗体的核糖体展示文库容量达1013以上.结论 成功构建了大容量天然人源核糖体展示scFv文库,为筛选到高亲和力和特异性抗体提供了技术平台.
目的 構建大容量天然人源覈糖體展示單鏈抗體(single chain Fv,scFv)文庫,為抗體研究提供方便有效的技術平檯.方法 收集健康獻血誌願者的白細胞懸液,離心分離單箇覈細胞,抽提其總RNA,逆轉錄成cDNA、PCR及重疊延伸PCR法構建scFv文庫,併通過第2次重疊延伸PCR在scFv DNA序列5'耑添加T7啟動子、莖環結構、覈糖體結閤位點,其3'耑添加6×His標籤、間隔序列(基因Ⅲ)、莖環結構等改造成覈糖體展示天然人源scFv文庫.結果 成功構建瞭可用于篩選抗體的覈糖體展示文庫容量達1013以上.結論 成功構建瞭大容量天然人源覈糖體展示scFv文庫,為篩選到高親和力和特異性抗體提供瞭技術平檯.
목적 구건대용량천연인원핵당체전시단련항체(single chain Fv,scFv)문고,위항체연구제공방편유효적기술평태.방법 수집건강헌혈지원자적백세포현액,리심분리단개핵세포,추제기총RNA,역전록성cDNA、PCR급중첩연신PCR법구건scFv문고,병통과제2차중첩연신PCR재scFv DNA서렬5'단첨가T7계동자、경배결구、핵당체결합위점,기3'단첨가6×His표첨、간격서렬(기인Ⅲ)、경배결구등개조성핵당체전시천연인원scFv문고.결과 성공구건료가용우사선항체적핵당체전시문고용량체1013이상.결론 성공구건료대용량천연인원핵당체전시scFv문고,위사선도고친화력화특이성항체제공료기술평태.
