中国循证心血管医学杂志
中國循證心血管醫學雜誌
중국순증심혈관의학잡지
CHINESE JOURNAL OF EVIDENCE-BASES CARDIOVASCULAR MEDICINE
2011年
4期
290-294
,共5页
钱丽娟%刘铁连%张晓峰%谢宇锋%盛伟华%缪竞成%韩亚丽%杨吉成
錢麗娟%劉鐵連%張曉峰%謝宇鋒%盛偉華%繆競成%韓亞麗%楊吉成
전려연%류철련%장효봉%사우봉%성위화%무경성%한아려%양길성
再生丝素膜%血管内皮生长因子%腺病毒%转基因
再生絲素膜%血管內皮生長因子%腺病毒%轉基因
재생사소막%혈관내피생장인자%선병독%전기인
目的 研究经腺病毒介导的人血管内皮生长因子165(VEGF165)转基因细胞修饰的再生丝素膜(SF)诱导血管形成活性及其分子机制.方法 将WI-38人胚肺成纤维细胞分别培养在有(SFC组)或无(PBS组)再生丝素膜的24孔培养板上,24 h后用带绿色荧光蛋白(GFP)基因的空载体腺病毒Ad-GFP(Ad-GFP组/SFCG组)或含有VEGF165目的 基因的重组腺病毒Ad-VEGF165(Ad-VEGF165组/SFCV组)感染培养细胞.通过形态学观察和ELISA法检测各组细胞培养上清液中VEGF165目的 基因表达及其对细胞自分泌的血管生成素-1(Ang-1)、碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)、血小板衍化生长因子(PDGF)表达的影响,并用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)和在兔眼角膜上进行新生血管诱导实验.结果 形态学观察发现WI-38细胞在再生丝素膜上不仅贴壁生长良好,而且易被Ad-GFP、Ad-VEGF165腺病毒感染,呈现强荧光.再生丝素膜利于Ad-VEGF165组中VEGF165目的 基因在细胞中的高表达(P＜0.05),而且还可使细胞自分泌的Ang-1表达水平明显升高(P＜0.05),同时可维持细胞自分泌的FGF2及PDGF稳定表达.Ad-VEGF165组(SFCV组)具有促进CAM上血管生长活性和诱导兔眼角膜组织新生血管生成作用.结论 Ad-VEGF165感染WI-38成纤维细胞所修饰的再生丝素膜,具有诱导血管新生的功能.
目的 研究經腺病毒介導的人血管內皮生長因子165(VEGF165)轉基因細胞脩飾的再生絲素膜(SF)誘導血管形成活性及其分子機製.方法 將WI-38人胚肺成纖維細胞分彆培養在有(SFC組)或無(PBS組)再生絲素膜的24孔培養闆上,24 h後用帶綠色熒光蛋白(GFP)基因的空載體腺病毒Ad-GFP(Ad-GFP組/SFCG組)或含有VEGF165目的 基因的重組腺病毒Ad-VEGF165(Ad-VEGF165組/SFCV組)感染培養細胞.通過形態學觀察和ELISA法檢測各組細胞培養上清液中VEGF165目的 基因錶達及其對細胞自分泌的血管生成素-1(Ang-1)、堿性成纖維細胞生長因子(FGF2)、血小闆衍化生長因子(PDGF)錶達的影響,併用鷄胚絨毛尿囊膜(CAM)和在兔眼角膜上進行新生血管誘導實驗.結果 形態學觀察髮現WI-38細胞在再生絲素膜上不僅貼壁生長良好,而且易被Ad-GFP、Ad-VEGF165腺病毒感染,呈現彊熒光.再生絲素膜利于Ad-VEGF165組中VEGF165目的 基因在細胞中的高錶達(P＜0.05),而且還可使細胞自分泌的Ang-1錶達水平明顯升高(P＜0.05),同時可維持細胞自分泌的FGF2及PDGF穩定錶達.Ad-VEGF165組(SFCV組)具有促進CAM上血管生長活性和誘導兔眼角膜組織新生血管生成作用.結論 Ad-VEGF165感染WI-38成纖維細胞所脩飾的再生絲素膜,具有誘導血管新生的功能.
목적 연구경선병독개도적인혈관내피생장인자165(VEGF165)전기인세포수식적재생사소막(SF)유도혈관형성활성급기분자궤제.방법 장WI-38인배폐성섬유세포분별배양재유(SFC조)혹무(PBS조)재생사소막적24공배양판상,24 h후용대록색형광단백(GFP)기인적공재체선병독Ad-GFP(Ad-GFP조/SFCG조)혹함유VEGF165목적 기인적중조선병독Ad-VEGF165(Ad-VEGF165조/SFCV조)감염배양세포.통과형태학관찰화ELISA법검측각조세포배양상청액중VEGF165목적 기인표체급기대세포자분비적혈관생성소-1(Ang-1)、감성성섬유세포생장인자(FGF2)、혈소판연화생장인자(PDGF)표체적영향,병용계배융모뇨낭막(CAM)화재토안각막상진행신생혈관유도실험.결과 형태학관찰발현WI-38세포재재생사소막상불부첩벽생장량호,이차역피Ad-GFP、Ad-VEGF165선병독감염,정현강형광.재생사소막리우Ad-VEGF165조중VEGF165목적 기인재세포중적고표체(P＜0.05),이차환가사세포자분비적Ang-1표체수평명현승고(P＜0.05),동시가유지세포자분비적FGF2급PDGF은정표체.Ad-VEGF165조(SFCV조)구유촉진CAM상혈관생장활성화유도토안각막조직신생혈관생성작용.결론 Ad-VEGF165감염WI-38성섬유세포소수식적재생사소막,구유유도혈관신생적공능.
