华南理工大学学报(自然科学版)
華南理工大學學報(自然科學版)
화남리공대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SOUTH CHINA UNIVERSITY OF TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2012年
1期
114-119
,共6页
TTF-1%腺相关病毒%小分子干扰RNA%载体%感染验证
TTF-1%腺相關病毒%小分子榦擾RNA%載體%感染驗證
TTF-1%선상관병독%소분자간우RNA%재체%감염험증
为了解决靶向TFF-1的siRNA导入肺腺癌细胞的问题,设计了3条靶向NCI-H1975细胞TTF-1基因的siRNA,并将其分别构建到腺相关病毒上.在293细胞中装配病毒,收获病毒原初液后进行超滤浓缩、层析柱纯化,测定病毒滴度.重组病毒感染肺腺癌细胞系NCI-H1975,通过Western-Blot实验检测siRNA效果,利用凋亡实验验证细胞生物学效应.Western-Blot实验测得siRNA有较好的干扰效果,凋亡实验测得肺腺癌细胞NCI-H1975产生了凋亡,从而证明具有感染性的靶向TTF-1的siRNA腺相关病毒载体组装成功.
為瞭解決靶嚮TFF-1的siRNA導入肺腺癌細胞的問題,設計瞭3條靶嚮NCI-H1975細胞TTF-1基因的siRNA,併將其分彆構建到腺相關病毒上.在293細胞中裝配病毒,收穫病毒原初液後進行超濾濃縮、層析柱純化,測定病毒滴度.重組病毒感染肺腺癌細胞繫NCI-H1975,通過Western-Blot實驗檢測siRNA效果,利用凋亡實驗驗證細胞生物學效應.Western-Blot實驗測得siRNA有較好的榦擾效果,凋亡實驗測得肺腺癌細胞NCI-H1975產生瞭凋亡,從而證明具有感染性的靶嚮TTF-1的siRNA腺相關病毒載體組裝成功.
위료해결파향TFF-1적siRNA도입폐선암세포적문제,설계료3조파향NCI-H1975세포TTF-1기인적siRNA,병장기분별구건도선상관병독상.재293세포중장배병독,수획병독원초액후진행초려농축、층석주순화,측정병독적도.중조병독감염폐선암세포계NCI-H1975,통과Western-Blot실험검측siRNA효과,이용조망실험험증세포생물학효응.Western-Blot실험측득siRNA유교호적간우효과,조망실험측득폐선암세포NCI-H1975산생료조망,종이증명구유감염성적파향TTF-1적siRNA선상관병독재체조장성공.