动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2012年
5期
35-38
,共4页
胡自立%刘海玲%张光明%张凯%高瑞娟%罗开健
鬍自立%劉海玲%張光明%張凱%高瑞娟%囉開健
호자립%류해령%장광명%장개%고서연%라개건
鹅细小病毒%VP3基因%原核表达
鵝細小病毒%VP3基因%原覈錶達
아세소병독%VP3기인%원핵표체
根据GenBank收录的鹅细小病毒(GPV)基因序列,设计并合成了一对VP3基因扩增引物.采用PCR技术对SS/10株的VP3基因进行扩增,将目的基因和原核表达载体PET-32a分别经HindⅢ和BamHⅠ双酶切后进行连接,获得重组质粒PET-32a-VP3,并将其转化表达菌BL21 (DE3) pLysS.经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,结果获得了72 ku左右的融合蛋白,大部分以包涵体的形式存在于菌体中.Wesern blot结果表明,该蛋白能与GPV阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性.
根據GenBank收錄的鵝細小病毒(GPV)基因序列,設計併閤成瞭一對VP3基因擴增引物.採用PCR技術對SS/10株的VP3基因進行擴增,將目的基因和原覈錶達載體PET-32a分彆經HindⅢ和BamHⅠ雙酶切後進行連接,穫得重組質粒PET-32a-VP3,併將其轉化錶達菌BL21 (DE3) pLysS.經IPTG誘導,SDS-PAGE分析,結果穫得瞭72 ku左右的融閤蛋白,大部分以包涵體的形式存在于菌體中.Wesern blot結果錶明,該蛋白能與GPV暘性血清髮生特異性反應,具有良好的反應原性.
근거GenBank수록적아세소병독(GPV)기인서렬,설계병합성료일대VP3기인확증인물.채용PCR기술대SS/10주적VP3기인진행확증,장목적기인화원핵표체재체PET-32a분별경HindⅢ화BamHⅠ쌍매절후진행련접,획득중조질립PET-32a-VP3,병장기전화표체균BL21 (DE3) pLysS.경IPTG유도,SDS-PAGE분석,결과획득료72 ku좌우적융합단백,대부분이포함체적형식존재우균체중.Wesern blot결과표명,해단백능여GPV양성혈청발생특이성반응,구유량호적반응원성.
