CAJ | 학술논문

目的探讨人死亡受体5(DR5)及其配体(TRAIL)和竞争性单克隆抗体(DR5mAb)对肝癌细胞凋亡的影响.方法采用半定量RT-PCR及Western blot法检测肝癌细胞株HepG2、SMMC7721和正常人肝细胞株LO2的DR5在mRNA和蛋白水平的表达含量.应用四甲基偶氮唑盐法测试细胞的生长曲线,以观察TRAIL和DR5mAb对肝癌细胞生长的抑制作用,并用流式细胞仪测定细胞的凋亡率.结果肝癌细胞株HepG2、SMMC7721的DR5高表达,正常人肝细胞株LO2的DR5低表达,差异有统计学意义(P＜0.05).肝癌细胞的增殖率随着TRAIL浓度的增加而逐渐降低,但当TRAIL超过1000 ng/ml时,肝癌细胞株的增殖率就不再下降;而肝癌细胞的增殖率随着DR5mAb浓度的增加而逐渐降低,呈现明显的剂量依赖关系.1000 ng/ml TRAIL处理24 h时,HepG2的凋亡率在14.74%±0.48%,继续增加TRAIL浓度,其凋亡率无显著改变;而同样剂量的DR5mAb处理24 h时,HepG2的凋亡率高达52.45%±0.57%,明显高于前者(P＜0.05).同时发现,正常人肝细胞株LO2的增殖率随着TRAIL浓度的增加呈下降趋势,与PBS阴性对照组差异有统计学意义(P＜0.05);而DR5mAb的浓度变化对人正常肝细胞株LO2无明显影响.结论死亡受体DR5在诱导肝癌细胞凋亡中起重要的作用;DR5mAb选择性地诱导肝癌细胞凋亡,对人正常肝细胞无诱导凋亡作用.
목적탐토인사망수체5(DR5)급기배체(TRAIL)화경쟁성단극륭항체(DR5mAb)대간암세포조망적영향.방법채용반정량RT-PCR급Western blot법검측간암세포주HepG2、SMMC7721화정상인간세포주LO2적DR5재mRNA화단백수평적표체함량.응용사갑기우담서염법측시세포적생장곡선,이관찰TRAIL화DR5mAb대간암세포생장적억제작용,병용류식세포의측정세포적조망솔.결과간암세포주HepG2、SMMC7721적DR5고표체,정상인간세포주LO2적DR5저표체,차이유통계학의의(P＜0.05).간암세포적증식솔수착TRAIL농도적증가이축점강저,단당TRAIL초과1000 ng/ml시,간암세포주적증식솔취불재하강;이간암세포적증식솔수착DR5mAb농도적증가이축점강저,정현명현적제량의뢰관계.1000 ng/ml TRAIL처리24 h시,HepG2적조망솔재14.74%±0.48%,계속증가TRAIL농도,기조망솔무현저개변;이동양제량적DR5mAb처리24 h시,HepG2적조망솔고체52.45%±0.57%,명현고우전자(P＜0.05).동시발현,정상인간세포주LO2적증식솔수착TRAIL농도적증가정하강추세,여PBS음성대조조차이유통계학의의(P＜0.05);이DR5mAb적농도변화대인정상간세포주LO2무명현영향.결론사망수체DR5재유도간암세포조망중기중요적작용;DR5mAb선택성지유도간암세포조망,대인정상간세포무유도조망작용.