弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体构建及在Vero细胞中的表达
궁형충표면항원SAG2적DNA역묘재체구건급재Vero세포중적표체
CLONING AND EUKARYOTIC EXPRESSION OF SAG2 GENE OF TOXOPLASMA GONDII
  • 万方数据
    中国寄生虫病防治杂志 중국기생충병방치잡지
    CHINESE JOURNAL OF PARASITIC DISEASE CONTROL
    2004年 6期 331-334 ,共4页

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    弓形虫%SAG2%基因克隆%表达 弓形蟲%SAG2%基因剋隆%錶達
    궁형충%SAG2%기인극륭%표체
    目的构建弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体,并在Vero细胞中表达. 方法设计1对引物,从弓形虫RH株速殖子基因组DNA中扩增SAG2全长编码基因,构建pVAX1-SAG2真核表达重组质粒.以限制性内切酶KpnⅠ和 EcoRⅠ进行双酶切、PCR鉴定,纯化后进行测序鉴定.脂质体介导法瞬时转染Vero细胞,同时以pVAX1为对照,48 h后收集细胞, Western-blot鉴定. 结果从弓形虫RH株DNA中扩增出了577 bp的SAG2基因,构建了真核表达载体pVAX1-SAG2,在质脂体介导下转染Vero细胞,质粒DNA成功的转染到细胞中.通过Westen-blot分析,细胞裂解液样品有1条可被弓形虫免疫血清所识别的约17 ku大小的条带,与预计大小一致. 结论真核表达载体pVAX1-SAG2在Vero细胞中有一定表达,且有一定的活性.
    목적구건궁형충표면항원SAG2적DNA역묘재체,병재Vero세포중표체. 방법설계1대인물,종궁형충RH주속식자기인조DNA중확증SAG2전장편마기인,구건pVAX1-SAG2진핵표체중조질립.이한제성내절매KpnⅠ화 EcoRⅠ진행쌍매절、PCR감정,순화후진행측서감정.지질체개도법순시전염Vero세포,동시이pVAX1위대조,48 h후수집세포, Western-blot감정. 결과종궁형충RH주DNA중확증출료577 bp적SAG2기인,구건료진핵표체재체pVAX1-SAG2,재질지체개도하전염Vero세포,질립DNA성공적전염도세포중.통과Westen-blot분석,세포렬해액양품유1조가피궁형충면역혈청소식별적약17 ku대소적조대,여예계대소일치. 결론진핵표체재체pVAX1-SAG2재Vero세포중유일정표체,차유일정적활성.
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