中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2005年
4期
504-507
,共4页
谢洁琼%吕秋军%温利青%赵金红%叶棋浓%陈振花
謝潔瓊%呂鞦軍%溫利青%趙金紅%葉棋濃%陳振花
사길경%려추군%온리청%조금홍%협기농%진진화
PPARγ%罗格列酮%荧光素酶%筛选模型%报告基因
PPARγ%囉格列酮%熒光素酶%篩選模型%報告基因
PPARγ%라격렬동%형광소매%사선모형%보고기인
目的建立基于报告基因和PPARγ(peroxisome proliferator-activated receptor γ)信号通路的药物筛选模型,用此模型筛选具有胰岛素增敏活性的小分子化合物.方法五种细胞分别进行瞬时转染,将含有目的片段PPRE(peroxisome proliferator response element)和报告基因荧光素酶(Luc)的质粒及表达PPARγ的质粒共转染到细胞中,通过测定荧光素酶活力来考察马来酸罗格列酮对PPARγ信号通路的影响,选取诱导表达倍数最高的细胞株建立模型.用其他类型核受体激动剂对此模型进行特异性考察.结果 293T细胞中,荧光素酶的表达受马来酸罗格列酮的诱导倍数最高,可达4.9倍,并呈现一定的剂量依赖关系,Z'因子为0.72.而其他各类核受体激动剂的诱导表达率均在1倍左右.马来酸罗格列酮在转染剂量范围内无促进细胞增殖的作用.结论马来酸罗格列酮对共转染报告基因质粒和表达PPARγ质粒的293T细胞Luc的表达具有较强的诱导作用,此模型具有较好的特异性和稳定性,适用于建立筛选PPARγ激动剂的高通量筛选模型.
目的建立基于報告基因和PPARγ(peroxisome proliferator-activated receptor γ)信號通路的藥物篩選模型,用此模型篩選具有胰島素增敏活性的小分子化閤物.方法五種細胞分彆進行瞬時轉染,將含有目的片段PPRE(peroxisome proliferator response element)和報告基因熒光素酶(Luc)的質粒及錶達PPARγ的質粒共轉染到細胞中,通過測定熒光素酶活力來攷察馬來痠囉格列酮對PPARγ信號通路的影響,選取誘導錶達倍數最高的細胞株建立模型.用其他類型覈受體激動劑對此模型進行特異性攷察.結果 293T細胞中,熒光素酶的錶達受馬來痠囉格列酮的誘導倍數最高,可達4.9倍,併呈現一定的劑量依賴關繫,Z'因子為0.72.而其他各類覈受體激動劑的誘導錶達率均在1倍左右.馬來痠囉格列酮在轉染劑量範圍內無促進細胞增殖的作用.結論馬來痠囉格列酮對共轉染報告基因質粒和錶達PPARγ質粒的293T細胞Luc的錶達具有較彊的誘導作用,此模型具有較好的特異性和穩定性,適用于建立篩選PPARγ激動劑的高通量篩選模型.
목적건립기우보고기인화PPARγ(peroxisome proliferator-activated receptor γ)신호통로적약물사선모형,용차모형사선구유이도소증민활성적소분자화합물.방법오충세포분별진행순시전염,장함유목적편단PPRE(peroxisome proliferator response element)화보고기인형광소매(Luc)적질립급표체PPARγ적질립공전염도세포중,통과측정형광소매활력래고찰마래산라격렬동대PPARγ신호통로적영향,선취유도표체배수최고적세포주건립모형.용기타류형핵수체격동제대차모형진행특이성고찰.결과 293T세포중,형광소매적표체수마래산라격렬동적유도배수최고,가체4.9배,병정현일정적제량의뢰관계,Z'인자위0.72.이기타각류핵수체격동제적유도표체솔균재1배좌우.마래산라격렬동재전염제량범위내무촉진세포증식적작용.결론마래산라격렬동대공전염보고기인질립화표체PPARγ질립적293T세포Luc적표체구유교강적유도작용,차모형구유교호적특이성화은정성,괄용우건립사선PPARγ격동제적고통량사선모형.
