中国职业医学
中國職業醫學
중국직업의학
CHINA OCCUPATIONAL MEDICINE
2007年
1期
1-3
,共3页
镉%细胞脱噬作用%基因表达
鎘%細胞脫噬作用%基因錶達
력%세포탈서작용%기인표체
目的 研究镉致细胞凋亡过程中Caspase-3和p53表达的变化,探讨Caspase-3和p53基因在镉致细胞凋亡中的作用.方法 离体培养的转化人胚肾293细胞以40 μmol/L氯化镉分别处理0～24 h,N-乙酰半胱氨酸(NAC)和Caspase-3特异性三肽抑制剂(Z-DEVD-fmk)预处理组分别在镉处理前以5 mmol/L NAC和10 μmol/L Z-DEVD-fmk预处理24 h和1 h,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westem blot法测Caspase-3和p53水平,流式细胞Anexin-V-PI双染法检测细胞凋亡率.结果 40 μmol/L镉处理293细胞,6～24 h Caspase-3基因mRNA水平显著增高,0～24 h内p53基因mRNA无显著变化.40 μmol/L镉处理293细胞,6～24 h内Caspase-3相对分子质量20 000的活性亚单位条带显著增强,与镉处理24 h组比较,NAC预处理组Caspase-3相对分子质量20 000的活性亚单位条带显著减弱(P＜0.01),Z-DEvD-fmk预处理组无明显变化(P＞0.05);40 μmol/L镉处理293细胞,p53蛋白在6～24 h表达增强(P＜0.01),与单纯镉处理24 h组比较,NAC和Z-DEVD-fmk预处理组p53蛋白表达无显著变化(P＞0.05).结论 Caspase-3基因在镉诱导细胞凋亡过程中起着重要的作用.
目的 研究鎘緻細胞凋亡過程中Caspase-3和p53錶達的變化,探討Caspase-3和p53基因在鎘緻細胞凋亡中的作用.方法 離體培養的轉化人胚腎293細胞以40 μmol/L氯化鎘分彆處理0～24 h,N-乙酰半胱氨痠(NAC)和Caspase-3特異性三肽抑製劑(Z-DEVD-fmk)預處理組分彆在鎘處理前以5 mmol/L NAC和10 μmol/L Z-DEVD-fmk預處理24 h和1 h,逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和Westem blot法測Caspase-3和p53水平,流式細胞Anexin-V-PI雙染法檢測細胞凋亡率.結果 40 μmol/L鎘處理293細胞,6～24 h Caspase-3基因mRNA水平顯著增高,0～24 h內p53基因mRNA無顯著變化.40 μmol/L鎘處理293細胞,6～24 h內Caspase-3相對分子質量20 000的活性亞單位條帶顯著增彊,與鎘處理24 h組比較,NAC預處理組Caspase-3相對分子質量20 000的活性亞單位條帶顯著減弱(P＜0.01),Z-DEvD-fmk預處理組無明顯變化(P＞0.05);40 μmol/L鎘處理293細胞,p53蛋白在6～24 h錶達增彊(P＜0.01),與單純鎘處理24 h組比較,NAC和Z-DEVD-fmk預處理組p53蛋白錶達無顯著變化(P＞0.05).結論 Caspase-3基因在鎘誘導細胞凋亡過程中起著重要的作用.
목적 연구력치세포조망과정중Caspase-3화p53표체적변화,탐토Caspase-3화p53기인재력치세포조망중적작용.방법 리체배양적전화인배신293세포이40 μmol/L록화력분별처리0～24 h,N-을선반광안산(NAC)화Caspase-3특이성삼태억제제(Z-DEVD-fmk)예처리조분별재력처리전이5 mmol/L NAC화10 μmol/L Z-DEVD-fmk예처리24 h화1 h,역전록-취합매련반응(RT-PCR)화Westem blot법측Caspase-3화p53수평,류식세포Anexin-V-PI쌍염법검측세포조망솔.결과 40 μmol/L력처리293세포,6～24 h Caspase-3기인mRNA수평현저증고,0～24 h내p53기인mRNA무현저변화.40 μmol/L력처리293세포,6～24 h내Caspase-3상대분자질량20 000적활성아단위조대현저증강,여력처리24 h조비교,NAC예처리조Caspase-3상대분자질량20 000적활성아단위조대현저감약(P＜0.01),Z-DEvD-fmk예처리조무명현변화(P＞0.05);40 μmol/L력처리293세포,p53단백재6～24 h표체증강(P＜0.01),여단순력처리24 h조비교,NAC화Z-DEVD-fmk예처리조p53단백표체무현저변화(P＞0.05).결론 Caspase-3기인재력유도세포조망과정중기착중요적작용.
