浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大學學報（農業與生命科學版）
절강대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2007年
6期
607-615
,共9页
康国章%张孟琴%官春云%郭天财%朱云集
康國章%張孟琴%官春雲%郭天財%硃雲集
강국장%장맹금%관춘운%곽천재%주운집
普通小麦%AGPase胞质型大亚基%表达载体
普通小麥%AGPase胞質型大亞基%錶達載體
보통소맥%AGPase포질형대아기%표체재체
采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的发育籽粒中克隆出AGPase胞质型大亚基基因(large subunit,LSUⅠ)的cDNA全长(1947 bp,GenBank No.DQ839506),同源性比较结果表明,与GenBank上已报道的LSUⅠ基因同源性达99%,虽与其有2处碱基不同(与Z21969相比,分别在851 bp处的T变为C和926 bp处的G变为A),但他们的氨基酸序列相同,故不影响其功能.以pBI121质粒为基础,通过中间载体pBSK,构建了由35S启动子调控的LSUⅠ基因的正义表达载体pBI121LSU Ⅰ S;将该基因反向置于pBI121质粒的CaMV35S启动子之后,构建了LSUⅠ的反义表达载体pBI121LSU Ⅰ A.同时还克隆出LSUⅠ基因的250 bp片段,以pFGC5941质粒为基础,构建了RNAi干扰载体pFGCLsuⅠ,这为研究该基因的功能打下了很好的基础.
採用RT-PCR方法從小麥品種豫教2號的髮育籽粒中剋隆齣AGPase胞質型大亞基基因(large subunit,LSUⅠ)的cDNA全長(1947 bp,GenBank No.DQ839506),同源性比較結果錶明,與GenBank上已報道的LSUⅠ基因同源性達99%,雖與其有2處堿基不同(與Z21969相比,分彆在851 bp處的T變為C和926 bp處的G變為A),但他們的氨基痠序列相同,故不影響其功能.以pBI121質粒為基礎,通過中間載體pBSK,構建瞭由35S啟動子調控的LSUⅠ基因的正義錶達載體pBI121LSU Ⅰ S;將該基因反嚮置于pBI121質粒的CaMV35S啟動子之後,構建瞭LSUⅠ的反義錶達載體pBI121LSU Ⅰ A.同時還剋隆齣LSUⅠ基因的250 bp片段,以pFGC5941質粒為基礎,構建瞭RNAi榦擾載體pFGCLsuⅠ,這為研究該基因的功能打下瞭很好的基礎.
채용RT-PCR방법종소맥품충예교2호적발육자립중극륭출AGPase포질형대아기기인(large subunit,LSUⅠ)적cDNA전장(1947 bp,GenBank No.DQ839506),동원성비교결과표명,여GenBank상이보도적LSUⅠ기인동원성체99%,수여기유2처감기불동(여Z21969상비,분별재851 bp처적T변위C화926 bp처적G변위A),단타문적안기산서렬상동,고불영향기공능.이pBI121질립위기출,통과중간재체pBSK,구건료유35S계동자조공적LSUⅠ기인적정의표체재체pBI121LSU Ⅰ S;장해기인반향치우pBI121질립적CaMV35S계동자지후,구건료LSUⅠ적반의표체재체pBI121LSU Ⅰ A.동시환극륭출LSUⅠ기인적250 bp편단,이pFGC5941질립위기출,구건료RNAi간우재체pFGCLsuⅠ,저위연구해기인적공능타하료흔호적기출.
