吉林农业大学学报
吉林農業大學學報
길임농업대학학보
JOURNAL OF JILIN AGRICUL TURAL UNIVERSITY
2008年
2期
213-218
,共6页
吴秀萍%赫荣华%邹洪斌%杨志东%P.Boireau%刘明远
吳秀萍%赫榮華%鄒洪斌%楊誌東%P.Boireau%劉明遠
오수평%혁영화%추홍빈%양지동%P.Boireau%류명원
旋毛虫%肌幼虫%反应原性%抗原基因%筛选
鏇毛蟲%肌幼蟲%反應原性%抗原基因%篩選
선모충%기유충%반응원성%항원기인%사선
应用感染旋毛虫60 d猪血清为抗体探针,对旋毛虫肌幼虫cDNA文库进行免疫筛选,获得旋毛虫肌幼虫期强反应原性抗原基因,利用生物学信息网站(NCBI、BLASr等)及其相关软件(DNA star等)对获得的基因进行序列分析.结果表明:筛选约2.5×105个重组噬菌体,获得13个阳性克隆,有6个克隆为同一个基因,编码蛋白与染色体结构维持蛋白(SMC蛋白,structural maintenance of chromosome proteins)同源性为48.1%,在免疫筛选中均有较强的反应信号;有3个克隆为同一个已知基因(AAF63473),编码蛋白与丝氨酸蛋白酶抑制因子(Serine protease inhibitor)同源性为99%,在免疫筛选中反应信号次之;还有2个为同一个基因,与旋毛虫线粒体(Mitochondrion of Trichinella spiralis)DNA有较高的同源性(同源性为87.7%),编码核糖体大亚基RNA,其他2个为未曾报道过的新基因,编码不同的未知蛋白,这4个克隆在免疫筛选过程中反应信号相对较弱.得到的2个强反应原性的旋毛虫肌幼虫cDNA分子,其中相对信号最强cDNA分子编码SMC蛋白,另一个编码丝氨酸蛋白酶抑制因子,二者有望用于旋毛虫病的诊断候选抗原基因.
應用感染鏇毛蟲60 d豬血清為抗體探針,對鏇毛蟲肌幼蟲cDNA文庫進行免疫篩選,穫得鏇毛蟲肌幼蟲期彊反應原性抗原基因,利用生物學信息網站(NCBI、BLASr等)及其相關軟件(DNA star等)對穫得的基因進行序列分析.結果錶明:篩選約2.5×105箇重組噬菌體,穫得13箇暘性剋隆,有6箇剋隆為同一箇基因,編碼蛋白與染色體結構維持蛋白(SMC蛋白,structural maintenance of chromosome proteins)同源性為48.1%,在免疫篩選中均有較彊的反應信號;有3箇剋隆為同一箇已知基因(AAF63473),編碼蛋白與絲氨痠蛋白酶抑製因子(Serine protease inhibitor)同源性為99%,在免疫篩選中反應信號次之;還有2箇為同一箇基因,與鏇毛蟲線粒體(Mitochondrion of Trichinella spiralis)DNA有較高的同源性(同源性為87.7%),編碼覈糖體大亞基RNA,其他2箇為未曾報道過的新基因,編碼不同的未知蛋白,這4箇剋隆在免疫篩選過程中反應信號相對較弱.得到的2箇彊反應原性的鏇毛蟲肌幼蟲cDNA分子,其中相對信號最彊cDNA分子編碼SMC蛋白,另一箇編碼絲氨痠蛋白酶抑製因子,二者有望用于鏇毛蟲病的診斷候選抗原基因.
응용감염선모충60 d저혈청위항체탐침,대선모충기유충cDNA문고진행면역사선,획득선모충기유충기강반응원성항원기인,이용생물학신식망참(NCBI、BLASr등)급기상관연건(DNA star등)대획득적기인진행서렬분석.결과표명:사선약2.5×105개중조서균체,획득13개양성극륭,유6개극륭위동일개기인,편마단백여염색체결구유지단백(SMC단백,structural maintenance of chromosome proteins)동원성위48.1%,재면역사선중균유교강적반응신호;유3개극륭위동일개이지기인(AAF63473),편마단백여사안산단백매억제인자(Serine protease inhibitor)동원성위99%,재면역사선중반응신호차지;환유2개위동일개기인,여선모충선립체(Mitochondrion of Trichinella spiralis)DNA유교고적동원성(동원성위87.7%),편마핵당체대아기RNA,기타2개위미증보도과적신기인,편마불동적미지단백,저4개극륭재면역사선과정중반응신호상대교약.득도적2개강반응원성적선모충기유충cDNA분자,기중상대신호최강cDNA분자편마SMC단백,령일개편마사안산단백매억제인자,이자유망용우선모충병적진단후선항원기인.