江苏医药
江囌醫藥
강소의약
JIANGSU MEDICAL JOURNAL
2008年
6期
555-557
,共3页
钟华平%赵伟%沈玲%薛蓉%吴引伟%殷艳天
鐘華平%趙偉%瀋玲%薛蓉%吳引偉%慇豔天
종화평%조위%침령%설용%오인위%은염천
外周血单个核细胞%丙型肝炎病毒
外週血單箇覈細胞%丙型肝炎病毒
외주혈단개핵세포%병형간염병독
目的 分析洗涤方法和冻存温度对外周血单个核细胞(PBMC)内HCV RNA含量的影响.方法 收集同一天内17例血清HCV RNA阳性慢性丙型肝炎患者PBMC,随机分成A组(6例)和B组(11例),A组把细胞分成2份后分别采用常规法及改良法洗涤细胞5次,并留取每次洗涤液及细胞;B组采用改良法洗涤细胞后把细胞分成2份,分别作为新鲜组和-20℃冻存组,然后采用离心柱型RNA提取法和实时荧光定量聚合酶链反应(FQPCR)检测洗涤液和细胞中HCV RNA含量.结果 (1)洗涤完3次时,常规法有1份洗涤液HCV为阳性,改良法均为阴性;与第1次洗涤液相比,改良法再洗涤1次的病毒含量下降幅度明显高于常规法;(2)新鲜组与冻存组HCV RNA含量不存在明显差异.结论 洗涤PBMC以采用改良法洗涤3次为宜;-20℃简易冻存6周的PBMC标本仍可用于FQPCR检测.
目的 分析洗滌方法和凍存溫度對外週血單箇覈細胞(PBMC)內HCV RNA含量的影響.方法 收集同一天內17例血清HCV RNA暘性慢性丙型肝炎患者PBMC,隨機分成A組(6例)和B組(11例),A組把細胞分成2份後分彆採用常規法及改良法洗滌細胞5次,併留取每次洗滌液及細胞;B組採用改良法洗滌細胞後把細胞分成2份,分彆作為新鮮組和-20℃凍存組,然後採用離心柱型RNA提取法和實時熒光定量聚閤酶鏈反應(FQPCR)檢測洗滌液和細胞中HCV RNA含量.結果 (1)洗滌完3次時,常規法有1份洗滌液HCV為暘性,改良法均為陰性;與第1次洗滌液相比,改良法再洗滌1次的病毒含量下降幅度明顯高于常規法;(2)新鮮組與凍存組HCV RNA含量不存在明顯差異.結論 洗滌PBMC以採用改良法洗滌3次為宜;-20℃簡易凍存6週的PBMC標本仍可用于FQPCR檢測.
목적 분석세조방법화동존온도대외주혈단개핵세포(PBMC)내HCV RNA함량적영향.방법 수집동일천내17례혈청HCV RNA양성만성병형간염환자PBMC,수궤분성A조(6례)화B조(11례),A조파세포분성2빈후분별채용상규법급개량법세조세포5차,병류취매차세조액급세포;B조채용개량법세조세포후파세포분성2빈,분별작위신선조화-20℃동존조,연후채용리심주형RNA제취법화실시형광정량취합매련반응(FQPCR)검측세조액화세포중HCV RNA함량.결과 (1)세조완3차시,상규법유1빈세조액HCV위양성,개량법균위음성;여제1차세조액상비,개량법재세조1차적병독함량하강폭도명현고우상규법;(2)신선조여동존조HCV RNA함량불존재명현차이.결론 세조PBMC이채용개량법세조3차위의;-20℃간역동존6주적PBMC표본잉가용우FQPCR검측.