上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2011年
1期
118-122
,共5页
施潇磊%陈小溪%金锐%李浩%薛佩%姚玉峰%陶晶
施瀟磊%陳小溪%金銳%李浩%薛珮%姚玉峰%陶晶
시소뢰%진소계%금예%리호%설패%요옥봉%도정
大肠埃希菌%VI型分泌系统%多克隆抗体%分泌蛋白
大腸埃希菌%VI型分泌繫統%多剋隆抗體%分泌蛋白
대장애희균%VI형분비계통%다극륭항체%분비단백
目的 为研究新近发现的大肠埃希菌(E.coli)VI型分泌系统的组成和功能,制备与之相关的三种重要蛋白AaiC,CRP和OmpA的多克隆抗体,并对分泌蛋白AaiC进行检测.方法 采用PC R技术扩增出目的 基因,并将其连接到pET-226或pQE80原核表达载体中,酶切及测序鉴定正确后转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达蛋白并纯化,使用纯化蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blotting检测抗体.应用AaiC抗体检测E.coli RS218菌株分泌蛋白.结果 重组质粒构建成功,并能够在E.coli中高效表达,免疫得到AaiC,CRP和OmpA高效价的特异性多克隆抗体.AaiC抗体检测证实RS218菌株能够分泌AaiC蛋白.结论 成功制备了E.coli三种重要蛋白AaiC,CRP和OmpA的特异性抗体,检测出RS218菌株分泌AaiC蛋白,为进一步研究E.coli VI型分泌系统的生物学功能以及E.coli的致病机制奠定了基础.
目的 為研究新近髮現的大腸埃希菌(E.coli)VI型分泌繫統的組成和功能,製備與之相關的三種重要蛋白AaiC,CRP和OmpA的多剋隆抗體,併對分泌蛋白AaiC進行檢測.方法 採用PC R技術擴增齣目的 基因,併將其連接到pET-226或pQE80原覈錶達載體中,酶切及測序鑒定正確後轉化E.coli BL21(DE3),經IPTG誘導錶達蛋白併純化,使用純化蛋白免疫新西蘭大白兔製備多剋隆抗體,併用Western blotting檢測抗體.應用AaiC抗體檢測E.coli RS218菌株分泌蛋白.結果 重組質粒構建成功,併能夠在E.coli中高效錶達,免疫得到AaiC,CRP和OmpA高效價的特異性多剋隆抗體.AaiC抗體檢測證實RS218菌株能夠分泌AaiC蛋白.結論 成功製備瞭E.coli三種重要蛋白AaiC,CRP和OmpA的特異性抗體,檢測齣RS218菌株分泌AaiC蛋白,為進一步研究E.coli VI型分泌繫統的生物學功能以及E.coli的緻病機製奠定瞭基礎.
목적 위연구신근발현적대장애희균(E.coli)VI형분비계통적조성화공능,제비여지상관적삼충중요단백AaiC,CRP화OmpA적다극륭항체,병대분비단백AaiC진행검측.방법 채용PC R기술확증출목적 기인,병장기련접도pET-226혹pQE80원핵표체재체중,매절급측서감정정학후전화E.coli BL21(DE3),경IPTG유도표체단백병순화,사용순화단백면역신서란대백토제비다극륭항체,병용Western blotting검측항체.응용AaiC항체검측E.coli RS218균주분비단백.결과 중조질립구건성공,병능구재E.coli중고효표체,면역득도AaiC,CRP화OmpA고효개적특이성다극륭항체.AaiC항체검측증실RS218균주능구분비AaiC단백.결론 성공제비료E.coli삼충중요단백AaiC,CRP화OmpA적특이성항체,검측출RS218균주분비AaiC단백,위진일보연구E.coli VI형분비계통적생물학공능이급E.coli적치병궤제전정료기출.
