畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2011年
6期
815-822
,共8页
蒋韬%任维维%梁仲%智晓莹%祁光宇%刘湘涛%才学鹏
蔣韜%任維維%樑仲%智曉瑩%祁光宇%劉湘濤%纔學鵬
장도%임유유%량중%지효형%기광우%류상도%재학붕
口蹄疫病毒%彩色胶乳%免疫层析%分型检测
口蹄疫病毒%綵色膠乳%免疫層析%分型檢測
구제역병독%채색효유%면역층석%분형검측
为建立一种快速、简便、直观的口蹄疫O、Asia 1分型彩色胶乳免疫层析的方法,作者选择2种不同颜色的单分散胶乳,将纯化的Asia 1/China/05流行毒株兔抗体制备蓝色免疫胶乳;将纯化的O/China/99流行毒株兔抗体制备红色免疫胶乳.将2种免疫胶乳分别喷涂于不同玻璃纤维上,晾干叠加制成彩色胶乳反应垫.再分别将纯化的Asia 1/YN/BSh/58/B和AV99(L)标准毒株的豚鼠抗体固定于同一硝酸纤维素膜的不同区域上作为2条检测带.最后组装成口蹄疫O、Asia 1分型彩色胶乳试纸条.通过对阳性参考样品的检测,结果显示试纸条有很好的灵敏度,可检测到病毒含量为3.90×104LD50;在检测与口蹄疫临床症状相似病原,如猪水泡病病毒(SVDV)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)抗原时无交叉反应,特异性好;不同批次间、同一批次内的试纸条,在检测阴、阳性参考样品时,结果完全一致,说明试纸条重复性好;试纸条对检测已知血清型的74份田间样品的符合性试验中,O型、Asia 1型样品的阳性符合率分别为95.24%、96.30%,阴性样品符合率为100%.本试验研发的口蹄疫O、Asia 1分型彩色胶乳试纸条具有很好的灵敏度、特异性、重复性和符合性,而且可以通过不同颜色进行定型检测,适合国内流行的口蹄疫病原型别的分型检测.
為建立一種快速、簡便、直觀的口蹄疫O、Asia 1分型綵色膠乳免疫層析的方法,作者選擇2種不同顏色的單分散膠乳,將純化的Asia 1/China/05流行毒株兔抗體製備藍色免疫膠乳;將純化的O/China/99流行毒株兔抗體製備紅色免疫膠乳.將2種免疫膠乳分彆噴塗于不同玻璃纖維上,晾榦疊加製成綵色膠乳反應墊.再分彆將純化的Asia 1/YN/BSh/58/B和AV99(L)標準毒株的豚鼠抗體固定于同一硝痠纖維素膜的不同區域上作為2條檢測帶.最後組裝成口蹄疫O、Asia 1分型綵色膠乳試紙條.通過對暘性參攷樣品的檢測,結果顯示試紙條有很好的靈敏度,可檢測到病毒含量為3.90×104LD50;在檢測與口蹄疫臨床癥狀相似病原,如豬水泡病病毒(SVDV)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)抗原時無交扠反應,特異性好;不同批次間、同一批次內的試紙條,在檢測陰、暘性參攷樣品時,結果完全一緻,說明試紙條重複性好;試紙條對檢測已知血清型的74份田間樣品的符閤性試驗中,O型、Asia 1型樣品的暘性符閤率分彆為95.24%、96.30%,陰性樣品符閤率為100%.本試驗研髮的口蹄疫O、Asia 1分型綵色膠乳試紙條具有很好的靈敏度、特異性、重複性和符閤性,而且可以通過不同顏色進行定型檢測,適閤國內流行的口蹄疫病原型彆的分型檢測.
위건립일충쾌속、간편、직관적구제역O、Asia 1분형채색효유면역층석적방법,작자선택2충불동안색적단분산효유,장순화적Asia 1/China/05류행독주토항체제비람색면역효유;장순화적O/China/99류행독주토항체제비홍색면역효유.장2충면역효유분별분도우불동파리섬유상,량간첩가제성채색효유반응점.재분별장순화적Asia 1/YN/BSh/58/B화AV99(L)표준독주적돈서항체고정우동일초산섬유소막적불동구역상작위2조검측대.최후조장성구제역O、Asia 1분형채색효유시지조.통과대양성삼고양품적검측,결과현시시지조유흔호적령민도,가검측도병독함량위3.90×104LD50;재검측여구제역림상증상상사병원,여저수포병병독(SVDV)、수포성구염(VS)、수포성진(VES)항원시무교차반응,특이성호;불동비차간、동일비차내적시지조,재검측음、양성삼고양품시,결과완전일치,설명시지조중복성호;시지조대검측이지혈청형적74빈전간양품적부합성시험중,O형、Asia 1형양품적양성부합솔분별위95.24%、96.30%,음성양품부합솔위100%.본시험연발적구제역O、Asia 1분형채색효유시지조구유흔호적령민도、특이성、중복성화부합성,이차가이통과불동안색진행정형검측,괄합국내류행적구제역병원형별적분형검측.
