胃肠病学和肝病学杂志
胃腸病學和肝病學雜誌
위장병학화간병학잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY
2011年
6期
538-541
,共4页
刘登群%龙爽%王军平%史春梦%冉新泽%粟永萍
劉登群%龍爽%王軍平%史春夢%冉新澤%粟永萍
류등군%룡상%왕군평%사춘몽%염신택%속영평
胃肠道%Cajal间质细胞%原代培养
胃腸道%Cajal間質細胞%原代培養
위장도%Cajal간질세포%원대배양
目的 尝试优化体外培养成年小鼠小肠Cajal间质细胞的操作方法,为深入研究该细胞的生理功能提供一定细胞模型.方法 6~8周龄C57BL/6小鼠禁食24 h,无菌条件下截取3~5 cm中段空肠,分离平滑肌肌条并剪至小块后使用Ⅱ型胶原酶消化20 min,离心后进行组织块原代培养,观察不同时期细胞形态.使用c-Kit免疫荧光染色鉴定细胞表型是否为Cajal间质细胞.Fluo-3 AM染色细胞内钙,观察细胞能否自发产生钙离子振荡.结果 分离所得组织不含空肠上皮和固有层组织,仅为小肠肌层.联合使用胶原酶消化和组织块原代培养能够较方便地培养出原代细胞,该细胞呈梭形,且具有细胞突起,彼此交织成网状.该细胞免疫荧光染色呈c-Kit阳性,平滑肌标志物SMA阴性.钙成像分析显示其能够产生钙离子振荡.结论 联合使用酶消化和组织块培养能够较方便地培养出成年小鼠的空肠Cajal间质细胞,该方法为后续探讨Cajal间质细胞的生理功能及机制提供了一定的细胞模型.
目的 嘗試優化體外培養成年小鼠小腸Cajal間質細胞的操作方法,為深入研究該細胞的生理功能提供一定細胞模型.方法 6~8週齡C57BL/6小鼠禁食24 h,無菌條件下截取3~5 cm中段空腸,分離平滑肌肌條併剪至小塊後使用Ⅱ型膠原酶消化20 min,離心後進行組織塊原代培養,觀察不同時期細胞形態.使用c-Kit免疫熒光染色鑒定細胞錶型是否為Cajal間質細胞.Fluo-3 AM染色細胞內鈣,觀察細胞能否自髮產生鈣離子振盪.結果 分離所得組織不含空腸上皮和固有層組織,僅為小腸肌層.聯閤使用膠原酶消化和組織塊原代培養能夠較方便地培養齣原代細胞,該細胞呈梭形,且具有細胞突起,彼此交織成網狀.該細胞免疫熒光染色呈c-Kit暘性,平滑肌標誌物SMA陰性.鈣成像分析顯示其能夠產生鈣離子振盪.結論 聯閤使用酶消化和組織塊培養能夠較方便地培養齣成年小鼠的空腸Cajal間質細胞,該方法為後續探討Cajal間質細胞的生理功能及機製提供瞭一定的細胞模型.
목적 상시우화체외배양성년소서소장Cajal간질세포적조작방법,위심입연구해세포적생리공능제공일정세포모형.방법 6~8주령C57BL/6소서금식24 h,무균조건하절취3~5 cm중단공장,분리평활기기조병전지소괴후사용Ⅱ형효원매소화20 min,리심후진행조직괴원대배양,관찰불동시기세포형태.사용c-Kit면역형광염색감정세포표형시부위Cajal간질세포.Fluo-3 AM염색세포내개,관찰세포능부자발산생개리자진탕.결과 분리소득조직불함공장상피화고유층조직,부위소장기층.연합사용효원매소화화조직괴원대배양능구교방편지배양출원대세포,해세포정사형,차구유세포돌기,피차교직성망상.해세포면역형광염색정c-Kit양성,평활기표지물SMA음성.개성상분석현시기능구산생개리자진탕.결론 연합사용매소화화조직괴배양능구교방편지배양출성년소서적공장Cajal간질세포,해방법위후속탐토Cajal간질세포적생리공능급궤제제공료일정적세포모형.
