中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
10期
88-93
,共6页
小鼠%胚胎成纤维细胞%脂质体%转染%抗猪瘟病毒基因
小鼠%胚胎成纖維細胞%脂質體%轉染%抗豬瘟病毒基因
소서%배태성섬유세포%지질체%전염%항저온병독기인
本研究旨在探索脂质体介导抗猪瘟病毒基因重组质粒pGPUG/GFP/Neo转染小鼠胚胎成纤维细胞的条件,为构建疾病模型动物及抗猪瘟病毒转基因猪提供技术平台.本研究比较了不同的小鼠胚胎成纤维细胞分离培养方法,将培养至3～5代的胚胎儿成纤维细胞,通过脂质体(LipofectamineTM 2000)介导转染抗猪瘟病毒基因重组质粒pGPUG/GFP/Neo.结果显示,在所选用的不同浓度脂质体和重组质粒,以及不同转染时间的组合中,2μL脂质体介导1.5 μg重组质粒,转染6h时可获得19％的转染效率,极显著高于其他剂量和时间组合(P＜0.01).这些结果表明,脂质体、重组质粒及转染时间的优化组合,能有效介导抗猪瘟病毒基因重组质粒pGPUG/GFP/Neo转染小鼠胚胎成纤维细胞.
本研究旨在探索脂質體介導抗豬瘟病毒基因重組質粒pGPUG/GFP/Neo轉染小鼠胚胎成纖維細胞的條件,為構建疾病模型動物及抗豬瘟病毒轉基因豬提供技術平檯.本研究比較瞭不同的小鼠胚胎成纖維細胞分離培養方法,將培養至3～5代的胚胎兒成纖維細胞,通過脂質體(LipofectamineTM 2000)介導轉染抗豬瘟病毒基因重組質粒pGPUG/GFP/Neo.結果顯示,在所選用的不同濃度脂質體和重組質粒,以及不同轉染時間的組閤中,2μL脂質體介導1.5 μg重組質粒,轉染6h時可穫得19％的轉染效率,極顯著高于其他劑量和時間組閤(P＜0.01).這些結果錶明,脂質體、重組質粒及轉染時間的優化組閤,能有效介導抗豬瘟病毒基因重組質粒pGPUG/GFP/Neo轉染小鼠胚胎成纖維細胞.
본연구지재탐색지질체개도항저온병독기인중조질립pGPUG/GFP/Neo전염소서배태성섬유세포적조건,위구건질병모형동물급항저온병독전기인저제공기술평태.본연구비교료불동적소서배태성섬유세포분리배양방법,장배양지3～5대적배태인성섬유세포,통과지질체(LipofectamineTM 2000)개도전염항저온병독기인중조질립pGPUG/GFP/Neo.결과현시,재소선용적불동농도지질체화중조질립,이급불동전염시간적조합중,2μL지질체개도1.5 μg중조질립,전염6h시가획득19％적전염효솔,겁현저고우기타제량화시간조합(P＜0.01).저사결과표명,지질체、중조질립급전염시간적우화조합,능유효개도항저온병독기인중조질립pGPUG/GFP/Neo전염소서배태성섬유세포.
