华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
1期
87-91
,共5页
张秀娟%李莉%卫恒习%白银山%师如意%张守全
張秀娟%李莉%衛恆習%白銀山%師如意%張守全
장수연%리리%위항습%백은산%사여의%장수전
昆明小鼠%精原干细胞%体外培养%MTT法
昆明小鼠%精原榦細胞%體外培養%MTT法
곤명소서%정원간세포%체외배양%MTT법
采用两步酶消化法获得5～7日龄昆明小鼠睾丸组织的单细胞悬液,比较差速贴壁法和Percoll不连续密度梯度法对精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)的纯化效果,并利用MTT法检测不同生长因子及添加浓度对SSCs体外增殖的影响.结果表明5日龄小鼠和7日龄小鼠的睾丸细胞总数存在较大差异(P＜0.05),但SSCs数目无显著差异(P＞0.05)；与Percoll不连续密度梯度法相比,差速贴壁法获得了较高的SSCs数量和纯化率,其纯化率平均85.06％；MTT法检测结果表明LIF因子的添加对SSCs的增殖具有促进作用,20 ng/mL GDNF+ 20 ng/mLbFGF+ 103 U/mL LIF的组合添加是昆明小鼠SSCs的体外培养增殖的最佳组合.
採用兩步酶消化法穫得5～7日齡昆明小鼠睪汍組織的單細胞懸液,比較差速貼壁法和Percoll不連續密度梯度法對精原榦細胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)的純化效果,併利用MTT法檢測不同生長因子及添加濃度對SSCs體外增殖的影響.結果錶明5日齡小鼠和7日齡小鼠的睪汍細胞總數存在較大差異(P＜0.05),但SSCs數目無顯著差異(P＞0.05)；與Percoll不連續密度梯度法相比,差速貼壁法穫得瞭較高的SSCs數量和純化率,其純化率平均85.06％；MTT法檢測結果錶明LIF因子的添加對SSCs的增殖具有促進作用,20 ng/mL GDNF+ 20 ng/mLbFGF+ 103 U/mL LIF的組閤添加是昆明小鼠SSCs的體外培養增殖的最佳組閤.
채용량보매소화법획득5～7일령곤명소서고환조직적단세포현액,비교차속첩벽법화Percoll불련속밀도제도법대정원간세포(Spermatogonial stem cells,SSCs)적순화효과,병이용MTT법검측불동생장인자급첨가농도대SSCs체외증식적영향.결과표명5일령소서화7일령소서적고환세포총수존재교대차이(P＜0.05),단SSCs수목무현저차이(P＞0.05)；여Percoll불련속밀도제도법상비,차속첩벽법획득료교고적SSCs수량화순화솔,기순화솔평균85.06％；MTT법검측결과표명LIF인자적첨가대SSCs적증식구유촉진작용,20 ng/mL GDNF+ 20 ng/mLbFGF+ 103 U/mL LIF적조합첨가시곤명소서SSCs적체외배양증식적최가조합.
