CAJ | 학술논문

目的研究奇果菌素(grifolin)诱导骨肉瘤U2OS细胞体外生长抑制及诱导凋亡的作用及其机制.方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定奇果菌素对U2OS细胞的生长抑制实验;荧光显微镜下(Hoechst 33258荧光染色)观察细胞核形态学变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;Western blot法检测Akt、GSK3、FKHRL蛋白表达.结果奇果菌素的浓度在50μm以上时对骨肉瘤U2OS细胞具有明显的生长抑制作用,呈明显的时间和浓度效应关系;并能诱导细胞发生凋亡,出现凋亡小体,呈典型的凋亡细胞形态;随着药物浓度的增加和作用时间的延长,细胞的生长抑制率及细胞凋亡率均明显升高,50.0μm的奇果菌素作用U2OS细胞0,6,12,24h后,细胞出现不同程度的亚G1峰,细胞凋亡率分别为1.96%、13.91%、52.6%、63.5%;Western blot法分析表明U2OS细胞经过50.0μm和100μm的奇果菌素作用24h后,U2OS细胞的Akt、FKHRL、GSK3的表达均下调,表示其表达水平及活性显著降低.结论奇果菌素能够通过诱导人骨肉瘤U2OS细胞发生凋亡而发挥抑制U2OS细胞生长作用,尤其当奇果菌素的浓度＞50.0μm,其对U2OS细胞增生的抑制作用呈剂量和时间依赖性,抑制Akt和GSK3的活性是奇果菌素体外诱导人骨肉瘤U2OS细胞发生凋亡的重要作用机制之一.
목적 연구기과균소(grifolin)유도골육류U2OS세포체외생장억제급유도조망적작용급기궤제.방법 응용사갑기우담서염(MTT)비색법측정기과균소대U2OS세포적생장억제실험;형광현미경하(Hoechst 33258형광염색)관찰세포핵형태학변화;류식세포의검측세포적조망솔;Western blot법검측Akt、GSK3、FKHRL단백표체.결과 기과균소적농도재50μm이상시대골육류U2OS세포구유명현적생장억제작용,정명현적시간화농도효응관계;병능유도세포발생조망,출현조망소체,정전형적조망세포형태;수착약물농도적증가화작용시간적연장,세포적생장억제솔급세포조망솔균명현승고,50.0μm적기과균소작용U2OS세포0,6,12,24h후,세포출현불동정도적아G1봉,세포조망솔분별위1.96%、13.91%、52.6%、63.5%;Western blot법분석표명U2OS세포경과50.0μm화100μm적기과균소작용24h후,U2OS세포적Akt、FKHRL、GSK3적표체균하조,표시기표체수평급활성현저강저.결론 기과균소능구통과유도인골육류U2OS세포발생조망이발휘억제U2OS세포생장작용,우기당기과균소적농도＞50.0μm,기대U2OS세포증생적억제작용정제량화시간의뢰성,억제Akt화GSK3적활성시기과균소체외유도인골육류U2OS세포발생조망적중요작용궤제지일.