畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
3期
410-415
,共6页
肖一红%王伟伟%张璐%高继明%马晓春%周恩民
肖一紅%王偉偉%張璐%高繼明%馬曉春%週恩民
초일홍%왕위위%장로%고계명%마효춘%주은민
CD151%Marc-145细胞%PRRSV%阻断
CD151%Marc-145細胞%PRRSV%阻斷
CD151%Marc-145세포%PRRSV%조단
为研究CD151与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的关系,根据GenBank中已发表的CD151蛋白的基因序列设计并合成一对特异性引物,从Marc-145细胞中扩增出294 bp的CD151基因片段并克隆入pGEX4T-3载体,转化人大肠杆菌用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定.表达蛋白纯化后用于免疫小鼠制备抗CD151蛋白血清,用ELISA和IFA检测抗血清的效价及特异性.将抗CD151蛋白血清与Marc-145细胞孵育后再感染PRRSV,观察细胞CPE验证该血清对PRRSV的阻断效果.结果表明成功构建了pGEX4T-3-CD151,获得了相对分子质量为37 ku的重组CD151蛋白.制备的抗血清特异性结合Marc-145细胞并有效阻断PRRSV感染Marc-145细胞.这些研究结果为进一步阐明CD151与PRRSV感染的关系提供一定的理论基础.
為研究CD151與豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)感染的關繫,根據GenBank中已髮錶的CD151蛋白的基因序列設計併閤成一對特異性引物,從Marc-145細胞中擴增齣294 bp的CD151基因片段併剋隆入pGEX4T-3載體,轉化人大腸桿菌用IPTG進行誘導錶達,經SDS-PAGE和Western blot對錶達產物進行鑒定.錶達蛋白純化後用于免疫小鼠製備抗CD151蛋白血清,用ELISA和IFA檢測抗血清的效價及特異性.將抗CD151蛋白血清與Marc-145細胞孵育後再感染PRRSV,觀察細胞CPE驗證該血清對PRRSV的阻斷效果.結果錶明成功構建瞭pGEX4T-3-CD151,穫得瞭相對分子質量為37 ku的重組CD151蛋白.製備的抗血清特異性結閤Marc-145細胞併有效阻斷PRRSV感染Marc-145細胞.這些研究結果為進一步闡明CD151與PRRSV感染的關繫提供一定的理論基礎.
위연구CD151여저번식여호흡종합정병독(PRRSV)감염적관계,근거GenBank중이발표적CD151단백적기인서렬설계병합성일대특이성인물,종Marc-145세포중확증출294 bp적CD151기인편단병극륭입pGEX4T-3재체,전화인대장간균용IPTG진행유도표체,경SDS-PAGE화Western blot대표체산물진행감정.표체단백순화후용우면역소서제비항CD151단백혈청,용ELISA화IFA검측항혈청적효개급특이성.장항CD151단백혈청여Marc-145세포부육후재감염PRRSV,관찰세포CPE험증해혈청대PRRSV적조단효과.결과표명성공구건료pGEX4T-3-CD151,획득료상대분자질량위37 ku적중조CD151단백.제비적항혈청특이성결합Marc-145세포병유효조단PRRSV감염Marc-145세포.저사연구결과위진일보천명CD151여PRRSV감염적관계제공일정적이론기출.
