国际眼科杂志
國際眼科雜誌
국제안과잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY
2004年
1期
60-65
,共6页
张平%吴德正%岳滔%朱振宇%林建贤%冯官光%郑湖铃
張平%吳德正%嶽滔%硃振宇%林建賢%馮官光%鄭湖鈴
장평%오덕정%악도%주진우%림건현%풍관광%정호령
内皮抑制素%基因治疗%抗新生血管形成%角膜新生血管
內皮抑製素%基因治療%抗新生血管形成%角膜新生血管
내피억제소%기인치료%항신생혈관형성%각막신생혈관
目的:探讨转染内皮抑制素(Endostatin)基因对酸烧伤引起的大鼠角膜新生血管的基因治疗.方法:通过限制性内切酶酶切反应、聚合酶链式反应、DNA测序及用NCBIBLAST软件与基因库序列比较的方法进行鉴定,鉴定后在大肠杆菌中扩增,用质粒纯化试剂盒抽提纯化;用750g/L硝酸银和250g/L硝酸钾混合烧灼液制作大鼠角膜新生血管模型,用结膜下注射脂质体包裹的质粒pB1asthEndostatin来进行体内基因治疗.结果:实验证实质粒pBlast-hEndostatin含有人endostatin基因.结膜下注射脂质体包裹的质粒pBlast-hEndostatin对酸烧伤引起的炎症性角膜新生血管有明显抑制作用,术后6,1O,15d对角膜新生血管面积的抑制率分别为37%,40%,43%;对角膜新生血管密度也有明显的抑制作用,抑制率达40%.对角膜新生血管长度和角膜炎症细胞没有明显抑制作用.角膜新生血管面积与角膜水肿、角膜混浊呈正相关.结论:用结膜下注射脂质体包裹的内皮抑制素基因可以部分抑制酸烧伤引起的大鼠角膜新生血管.其作用机制是转基因产生的内皮抑制素蛋白直接抑制角膜新生血管的形成,而不是通过抑制炎症反应来抑制角膜新生血管的形成.
目的:探討轉染內皮抑製素(Endostatin)基因對痠燒傷引起的大鼠角膜新生血管的基因治療.方法:通過限製性內切酶酶切反應、聚閤酶鏈式反應、DNA測序及用NCBIBLAST軟件與基因庫序列比較的方法進行鑒定,鑒定後在大腸桿菌中擴增,用質粒純化試劑盒抽提純化;用750g/L硝痠銀和250g/L硝痠鉀混閤燒灼液製作大鼠角膜新生血管模型,用結膜下註射脂質體包裹的質粒pB1asthEndostatin來進行體內基因治療.結果:實驗證實質粒pBlast-hEndostatin含有人endostatin基因.結膜下註射脂質體包裹的質粒pBlast-hEndostatin對痠燒傷引起的炎癥性角膜新生血管有明顯抑製作用,術後6,1O,15d對角膜新生血管麵積的抑製率分彆為37%,40%,43%;對角膜新生血管密度也有明顯的抑製作用,抑製率達40%.對角膜新生血管長度和角膜炎癥細胞沒有明顯抑製作用.角膜新生血管麵積與角膜水腫、角膜混濁呈正相關.結論:用結膜下註射脂質體包裹的內皮抑製素基因可以部分抑製痠燒傷引起的大鼠角膜新生血管.其作用機製是轉基因產生的內皮抑製素蛋白直接抑製角膜新生血管的形成,而不是通過抑製炎癥反應來抑製角膜新生血管的形成.
목적:탐토전염내피억제소(Endostatin)기인대산소상인기적대서각막신생혈관적기인치료.방법:통과한제성내절매매절반응、취합매련식반응、DNA측서급용NCBIBLAST연건여기인고서렬비교적방법진행감정,감정후재대장간균중확증,용질립순화시제합추제순화;용750g/L초산은화250g/L초산갑혼합소작액제작대서각막신생혈관모형,용결막하주사지질체포과적질립pB1asthEndostatin래진행체내기인치료.결과:실험증실질립pBlast-hEndostatin함유인endostatin기인.결막하주사지질체포과적질립pBlast-hEndostatin대산소상인기적염증성각막신생혈관유명현억제작용,술후6,1O,15d대각막신생혈관면적적억제솔분별위37%,40%,43%;대각막신생혈관밀도야유명현적억제작용,억제솔체40%.대각막신생혈관장도화각막염증세포몰유명현억제작용.각막신생혈관면적여각막수종、각막혼탁정정상관.결론:용결막하주사지질체포과적내피억제소기인가이부분억제산소상인기적대서각막신생혈관.기작용궤제시전기인산생적내피억제소단백직접억제각막신생혈관적형성,이불시통과억제염증반응래억제각막신생혈관적형성.