军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2005年
2期
127-131
,共5页
陈日升%齐连权%于长明%付玲%于婷%陈薇
陳日升%齊連權%于長明%付玲%于婷%陳薇
진일승%제련권%우장명%부령%우정%진미
DNA甲基转移酶1(DNMT1)%甲基化%RNA干涉%RASSF1A
DNA甲基轉移酶1(DNMT1)%甲基化%RNA榦涉%RASSF1A
DNA갑기전이매1(DNMT1)%갑기화%RNA간섭%RASSF1A
目的:通过抑制肺癌细胞DNA甲基转移酶1(DNMT1)的表达,从而部分恢复抑癌基因的表达.方法:采用RNAi技术来抑制DNMT1的活性.应用体外转录的方法,共合成了5个针对DNMT1不同靶位的siRNA序列,并转染人肺癌细胞NCI-H157.采用MSP-PCR、COBRA等方法对抑癌基因RASSF1A进行甲基化分析,半定量RT-PCR检测DNMT1 mRNA的敲降与RASSF1A基因的表达.结果与结论:5个靶位的siRNA序列中有两个靶位能够有效地抑制DNMT1的表达,且呈剂量依赖效应.人肺癌细胞NCI-H157中抑癌基因RASSF1A发生了高度甲基化,在抑制DNMT1活性后, RASSF1A基因去甲基化而恢复表达.
目的:通過抑製肺癌細胞DNA甲基轉移酶1(DNMT1)的錶達,從而部分恢複抑癌基因的錶達.方法:採用RNAi技術來抑製DNMT1的活性.應用體外轉錄的方法,共閤成瞭5箇針對DNMT1不同靶位的siRNA序列,併轉染人肺癌細胞NCI-H157.採用MSP-PCR、COBRA等方法對抑癌基因RASSF1A進行甲基化分析,半定量RT-PCR檢測DNMT1 mRNA的敲降與RASSF1A基因的錶達.結果與結論:5箇靶位的siRNA序列中有兩箇靶位能夠有效地抑製DNMT1的錶達,且呈劑量依賴效應.人肺癌細胞NCI-H157中抑癌基因RASSF1A髮生瞭高度甲基化,在抑製DNMT1活性後, RASSF1A基因去甲基化而恢複錶達.
목적:통과억제폐암세포DNA갑기전이매1(DNMT1)적표체,종이부분회복억암기인적표체.방법:채용RNAi기술래억제DNMT1적활성.응용체외전록적방법,공합성료5개침대DNMT1불동파위적siRNA서렬,병전염인폐암세포NCI-H157.채용MSP-PCR、COBRA등방법대억암기인RASSF1A진행갑기화분석,반정량RT-PCR검측DNMT1 mRNA적고강여RASSF1A기인적표체.결과여결론:5개파위적siRNA서렬중유량개파위능구유효지억제DNMT1적표체,차정제량의뢰효응.인폐암세포NCI-H157중억암기인RASSF1A발생료고도갑기화,재억제DNMT1활성후, RASSF1A기인거갑기화이회복표체.
