中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2005年
2期
108-112
,共5页
卞继峰%于修平%耿昭%卢翌%胡海燕%王伟%王晓明
卞繼峰%于脩平%耿昭%盧翌%鬍海燕%王偉%王曉明
변계봉%우수평%경소%로익%호해연%왕위%왕효명
乳头瘤病毒%疫苗%沙门氏细菌%内源诱导启动子
乳頭瘤病毒%疫苗%沙門氏細菌%內源誘導啟動子
유두류병독%역묘%사문씨세균%내원유도계동자
将人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)16 L1E7基因插入携带霍乱毒素基因的pET-CTA2B载体,获得HPV16L1E7与CTA2B融合表达质粒pET-L1E7CTA2B.在此基础上,通过PCR基因克隆技术,将pET载体的T7启动子与pTETnir15载体的大肠杆菌硝酸盐还原酶基因B启动子nirB进行分割重组,将nirB启动子的厌氧调控元件和启动子基本元件FNR-TATA盒与T7启动子的核糖体结合位点(SD)序列融合,形成nirB-T7杂合启动子.最后获得HPV16重组减毒沙门氏细菌疫苗表达载体pNir-16L1E7CTA2B,并进一步构建对照质粒pNir-16L1E7.Western blot结果证实以上质粒nirB-T7杂合启动子能够在沙门氏细菌中表达L1E7融合蛋白.口服免疫接种小鼠可成功诱导小鼠生殖道产生HPV16特异性粘膜免疫,且霍乱毒素CTA2B可以增强粘膜免疫诱导能力,为开发廉价有效的HPV16预防性疫苗打下了基础.
將人乳頭瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)16 L1E7基因插入攜帶霍亂毒素基因的pET-CTA2B載體,穫得HPV16L1E7與CTA2B融閤錶達質粒pET-L1E7CTA2B.在此基礎上,通過PCR基因剋隆技術,將pET載體的T7啟動子與pTETnir15載體的大腸桿菌硝痠鹽還原酶基因B啟動子nirB進行分割重組,將nirB啟動子的厭氧調控元件和啟動子基本元件FNR-TATA盒與T7啟動子的覈糖體結閤位點(SD)序列融閤,形成nirB-T7雜閤啟動子.最後穫得HPV16重組減毒沙門氏細菌疫苗錶達載體pNir-16L1E7CTA2B,併進一步構建對照質粒pNir-16L1E7.Western blot結果證實以上質粒nirB-T7雜閤啟動子能夠在沙門氏細菌中錶達L1E7融閤蛋白.口服免疫接種小鼠可成功誘導小鼠生殖道產生HPV16特異性粘膜免疫,且霍亂毒素CTA2B可以增彊粘膜免疫誘導能力,為開髮廉價有效的HPV16預防性疫苗打下瞭基礎.
장인유두류병독(Human papillomavirus,HPV)16 L1E7기인삽입휴대곽란독소기인적pET-CTA2B재체,획득HPV16L1E7여CTA2B융합표체질립pET-L1E7CTA2B.재차기출상,통과PCR기인극륭기술,장pET재체적T7계동자여pTETnir15재체적대장간균초산염환원매기인B계동자nirB진행분할중조,장nirB계동자적염양조공원건화계동자기본원건FNR-TATA합여T7계동자적핵당체결합위점(SD)서렬융합,형성nirB-T7잡합계동자.최후획득HPV16중조감독사문씨세균역묘표체재체pNir-16L1E7CTA2B,병진일보구건대조질립pNir-16L1E7.Western blot결과증실이상질립nirB-T7잡합계동자능구재사문씨세균중표체L1E7융합단백.구복면역접충소서가성공유도소서생식도산생HPV16특이성점막면역,차곽란독소CTA2B가이증강점막면역유도능력,위개발렴개유효적HPV16예방성역묘타하료기출.
