中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2006年
5期
398-404
,共7页
王海%敖红%潘求真%李荣旗%赵孟彬%连正兴%李宁%吴常信
王海%敖紅%潘求真%李榮旂%趙孟彬%連正興%李寧%吳常信
왕해%오홍%반구진%리영기%조맹빈%련정흥%리저%오상신
绵羊%胎儿成纤维细胞%核移植%秋水仙素%血清饥饿%绿色荧光蛋白基因(GFP)
綿羊%胎兒成纖維細胞%覈移植%鞦水仙素%血清饑餓%綠色熒光蛋白基因(GFP)
면양%태인성섬유세포%핵이식%추수선소%혈청기아%록색형광단백기인(GFP)
研究供体细胞代数、大小、周期以及基因转染处理对重构胚发育的影响.结果如下:(i)体外培养5～7代细胞做供体核,重构胚的桑椹/囊胚率显著高于16～18代细胞的桑椹/囊胚率(17.3%vs.4.9%,P＜0.05);(ii)15～25 μm细胞做供体核,重构胚的桑椹/囊胚率为20.0%,高于8～15 μm细胞、25～33 μm细胞桑椹/囊胚率(8.0%,9.7%),但效果不显著(P＞0.05);(iii)血清饥饿与非血清饥饿的细胞做供体核,重构胚的桑椹/囊胚发育率没有显著性差异(11.8%vs.18.6%,P＞0.05),但非血清饥饿的效果要好于血清饥饿;(iv)用0.05 μmol/L秋水仙素处理供体细胞效果最好,重构胚的桑椹/囊胚率可达27.5%,而未处理或用0.1 μmol/L秋水仙素处理供体细胞,重构胚的桑椹/囊胚率分别为17.1%和12.1%,但三者之间差异不显著(P＞0.05);(v)以转染绿色荧光蛋白基因(GFP)细胞做供体核,重构胚的桑椹/囊胚率显著低于非转基因细胞做供体核的桑椹/囊胚率(3.1%vs.20.4%,P＜0.05).上述结果表明,传代少、中等大小的细胞更适合做供体核;血清饥饿没有必要;用0.05 μmol/L秋水仙素处理供体细胞有利于重构胚的发育;转基因供体细胞对重构胚发育有影响.
研究供體細胞代數、大小、週期以及基因轉染處理對重構胚髮育的影響.結果如下:(i)體外培養5～7代細胞做供體覈,重構胚的桑椹/囊胚率顯著高于16～18代細胞的桑椹/囊胚率(17.3%vs.4.9%,P＜0.05);(ii)15～25 μm細胞做供體覈,重構胚的桑椹/囊胚率為20.0%,高于8～15 μm細胞、25～33 μm細胞桑椹/囊胚率(8.0%,9.7%),但效果不顯著(P＞0.05);(iii)血清饑餓與非血清饑餓的細胞做供體覈,重構胚的桑椹/囊胚髮育率沒有顯著性差異(11.8%vs.18.6%,P＞0.05),但非血清饑餓的效果要好于血清饑餓;(iv)用0.05 μmol/L鞦水仙素處理供體細胞效果最好,重構胚的桑椹/囊胚率可達27.5%,而未處理或用0.1 μmol/L鞦水仙素處理供體細胞,重構胚的桑椹/囊胚率分彆為17.1%和12.1%,但三者之間差異不顯著(P＞0.05);(v)以轉染綠色熒光蛋白基因(GFP)細胞做供體覈,重構胚的桑椹/囊胚率顯著低于非轉基因細胞做供體覈的桑椹/囊胚率(3.1%vs.20.4%,P＜0.05).上述結果錶明,傳代少、中等大小的細胞更適閤做供體覈;血清饑餓沒有必要;用0.05 μmol/L鞦水仙素處理供體細胞有利于重構胚的髮育;轉基因供體細胞對重構胚髮育有影響.
연구공체세포대수、대소、주기이급기인전염처리대중구배발육적영향.결과여하:(i)체외배양5～7대세포주공체핵,중구배적상심/낭배솔현저고우16～18대세포적상심/낭배솔(17.3%vs.4.9%,P＜0.05);(ii)15～25 μm세포주공체핵,중구배적상심/낭배솔위20.0%,고우8～15 μm세포、25～33 μm세포상심/낭배솔(8.0%,9.7%),단효과불현저(P＞0.05);(iii)혈청기아여비혈청기아적세포주공체핵,중구배적상심/낭배발육솔몰유현저성차이(11.8%vs.18.6%,P＞0.05),단비혈청기아적효과요호우혈청기아;(iv)용0.05 μmol/L추수선소처리공체세포효과최호,중구배적상심/낭배솔가체27.5%,이미처리혹용0.1 μmol/L추수선소처리공체세포,중구배적상심/낭배솔분별위17.1%화12.1%,단삼자지간차이불현저(P＞0.05);(v)이전염록색형광단백기인(GFP)세포주공체핵,중구배적상심/낭배솔현저저우비전기인세포주공체핵적상심/낭배솔(3.1%vs.20.4%,P＜0.05).상술결과표명,전대소、중등대소적세포경괄합주공체핵;혈청기아몰유필요;용0.05 μmol/L추수선소처리공체세포유리우중구배적발육;전기인공체세포대중구배발육유영향.
