农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2009年
3期
522-528
,共7页
张争%徐进%许景升%何礼远%冯洁
張爭%徐進%許景升%何禮遠%馮潔
장쟁%서진%허경승%하례원%풍길
茄科雷尔氏菌%aac基因%基因敲除%群体感应信号%群体猝灭
茄科雷爾氏菌%aac基因%基因敲除%群體感應信號%群體猝滅
가과뢰이씨균%aac기인%기인고제%군체감응신호%군체졸멸
根据青枯菌(Ralstonia solanacearum)与群体猝灭相关aac基因序列设计PCR引物,扩增并克隆了aac基因,将庆大霉素基因(GMr)插入aac基因内部,亚克隆至自杀质粒pDSl32中,构建了aac基因重组自杀质粒pDS-aa-Gm.将自杀质粒电转化至青枯菌GMI1000菌株中,通过体内同源重组,置换其野生型的8ac基因.通过三步筛选法和PCR扩增鉴定,筛选获得了具有庆大霉素抗性的青枯菌aac基因突变株(GMl1000-m).土壤接种番茄青枯菌结果显示,突变株GMI1000-m的致病性较野生型GMl1000明显下降.证明aac基因在青枯菌致病过程中具有重要作用.
根據青枯菌(Ralstonia solanacearum)與群體猝滅相關aac基因序列設計PCR引物,擴增併剋隆瞭aac基因,將慶大黴素基因(GMr)插入aac基因內部,亞剋隆至自殺質粒pDSl32中,構建瞭aac基因重組自殺質粒pDS-aa-Gm.將自殺質粒電轉化至青枯菌GMI1000菌株中,通過體內同源重組,置換其野生型的8ac基因.通過三步篩選法和PCR擴增鑒定,篩選穫得瞭具有慶大黴素抗性的青枯菌aac基因突變株(GMl1000-m).土壤接種番茄青枯菌結果顯示,突變株GMI1000-m的緻病性較野生型GMl1000明顯下降.證明aac基因在青枯菌緻病過程中具有重要作用.
근거청고균(Ralstonia solanacearum)여군체졸멸상관aac기인서렬설계PCR인물,확증병극륭료aac기인,장경대매소기인(GMr)삽입aac기인내부,아극륭지자살질립pDSl32중,구건료aac기인중조자살질립pDS-aa-Gm.장자살질립전전화지청고균GMI1000균주중,통과체내동원중조,치환기야생형적8ac기인.통과삼보사선법화PCR확증감정,사선획득료구유경대매소항성적청고균aac기인돌변주(GMl1000-m).토양접충번가청고균결과현시,돌변주GMI1000-m적치병성교야생형GMl1000명현하강.증명aac기인재청고균치병과정중구유중요작용.
