数理医药学杂志
數理醫藥學雜誌
수리의약학잡지
JOURNAL OF MATHEMATICAL MEDICINE
2010年
5期
516-518
,共3页
陈明%孙红宇%文荣朝%余政梁%吴巧琪%夏许可%张兴梅%高天明
陳明%孫紅宇%文榮朝%餘政樑%吳巧琪%夏許可%張興梅%高天明
진명%손홍우%문영조%여정량%오교기%하허가%장흥매%고천명
EGFRvIII%U87MG细胞%基因表达
EGFRvIII%U87MG細胞%基因錶達
EGFRvIII%U87MG세포%기인표체
目的:构建稳定表达表皮生长因子受体III型突变体(EGFRvIII)的U87MG细胞株.方法:采用电转染方法将pcDNA4/TO-EGFRvIII质粒导入U87MG细胞,加入zeocin筛选,进一步将细胞有限稀释并克隆化培养以建立稳定的转染细胞株.应用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定稳定表达EGFRvIII基因的细胞株.结果:经RT-PCR鉴定发现V6号和V24号单克隆细胞株EGFRvIII基因mRNA水平高表达,进一步Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定发现V6号细胞株EGFRvIII蛋白水平高表达.结论:成功建立了稳定表达EGFRvIII的U87MG细胞株,为进一步的抗肿瘤治疗及其机制研究提供基础.
目的:構建穩定錶達錶皮生長因子受體III型突變體(EGFRvIII)的U87MG細胞株.方法:採用電轉染方法將pcDNA4/TO-EGFRvIII質粒導入U87MG細胞,加入zeocin篩選,進一步將細胞有限稀釋併剋隆化培養以建立穩定的轉染細胞株.應用RT-PCR、Western blot及細胞免疫熒光染色方法鑒定穩定錶達EGFRvIII基因的細胞株.結果:經RT-PCR鑒定髮現V6號和V24號單剋隆細胞株EGFRvIII基因mRNA水平高錶達,進一步Western blot及細胞免疫熒光染色方法鑒定髮現V6號細胞株EGFRvIII蛋白水平高錶達.結論:成功建立瞭穩定錶達EGFRvIII的U87MG細胞株,為進一步的抗腫瘤治療及其機製研究提供基礎.
목적:구건은정표체표피생장인자수체III형돌변체(EGFRvIII)적U87MG세포주.방법:채용전전염방법장pcDNA4/TO-EGFRvIII질립도입U87MG세포,가입zeocin사선,진일보장세포유한희석병극륭화배양이건립은정적전염세포주.응용RT-PCR、Western blot급세포면역형광염색방법감정은정표체EGFRvIII기인적세포주.결과:경RT-PCR감정발현V6호화V24호단극륭세포주EGFRvIII기인mRNA수평고표체,진일보Western blot급세포면역형광염색방법감정발현V6호세포주EGFRvIII단백수평고표체.결론:성공건립료은정표체EGFRvIII적U87MG세포주,위진일보적항종류치료급기궤제연구제공기출.
