潍坊医学院学报
濰坊醫學院學報
유방의학원학보
JOURNAL OF WEIFANG MEDICAL COLLEGE
2010年
2期
81-84,106
,共5页
崔杰%辛宁%冯永堂%鞠吉雨%王成伟%刘艳菲%苗乃法
崔傑%辛寧%馮永堂%鞠吉雨%王成偉%劉豔菲%苗迺法
최걸%신저%풍영당%국길우%왕성위%류염비%묘내법
OX40%单克隆抗体%杂交瘤
OX40%單剋隆抗體%雜交瘤
OX40%단극륭항체%잡교류
目的 应用杂交瘤技术,制备鼠抗人OX40单克隆抗体.方法 以本室纯化的OX40胞外段融合蛋白免疫6～8周龄的雌性BalB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞阳性克隆.用杂交瘤细胞接种小鼠腹腔诱生腹水,腹水经饱和硫酸铵纯化沉淀后用间接ELISA法测定抗体的Ig类别.SDS-PAGE分析抗体的纯化程度,用免疫组化技术鉴定单克隆抗体与表达有OX40分子的组织及细胞特异性结合的情况.结果 获得1株能稳定分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞,细胞株诱生的小鼠腹水纯化后抗体纯度较高,Ig类别为IgG,蛋白浓度为6.129g/L.制备的单抗经淋巴细胞免疫组化及炎性淋巴组织免疫组化技术初步鉴定结果表明,该抗体与OX40单克隆抗体标准品制剂相比具有类同的特异性.结论 成功获得能稳定分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备的单克隆抗体具有较高的纯度和活性.
目的 應用雜交瘤技術,製備鼠抗人OX40單剋隆抗體.方法 以本室純化的OX40胞外段融閤蛋白免疫6～8週齡的雌性BalB/c小鼠,取免疫小鼠脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞融閤,篩選分泌鼠抗人OX40單剋隆抗體的雜交瘤細胞暘性剋隆.用雜交瘤細胞接種小鼠腹腔誘生腹水,腹水經飽和硫痠銨純化沉澱後用間接ELISA法測定抗體的Ig類彆.SDS-PAGE分析抗體的純化程度,用免疫組化技術鑒定單剋隆抗體與錶達有OX40分子的組織及細胞特異性結閤的情況.結果 穫得1株能穩定分泌鼠抗人OX40單剋隆抗體的雜交瘤細胞,細胞株誘生的小鼠腹水純化後抗體純度較高,Ig類彆為IgG,蛋白濃度為6.129g/L.製備的單抗經淋巴細胞免疫組化及炎性淋巴組織免疫組化技術初步鑒定結果錶明,該抗體與OX40單剋隆抗體標準品製劑相比具有類同的特異性.結論 成功穫得能穩定分泌鼠抗人OX40單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,製備的單剋隆抗體具有較高的純度和活性.
목적 응용잡교류기술,제비서항인OX40단극륭항체.방법 이본실순화적OX40포외단융합단백면역6～8주령적자성BalB/c소서,취면역소서비세포여SP2/0골수류세포융합,사선분비서항인OX40단극륭항체적잡교류세포양성극륭.용잡교류세포접충소서복강유생복수,복수경포화류산안순화침정후용간접ELISA법측정항체적Ig유별.SDS-PAGE분석항체적순화정도,용면역조화기술감정단극륭항체여표체유OX40분자적조직급세포특이성결합적정황.결과 획득1주능은정분비서항인OX40단극륭항체적잡교류세포,세포주유생적소서복수순화후항체순도교고,Ig유별위IgG,단백농도위6.129g/L.제비적단항경림파세포면역조화급염성림파조직면역조화기술초보감정결과표명,해항체여OX40단극륭항체표준품제제상비구유류동적특이성.결론 성공획득능은정분비서항인OX40단극륭항체적잡교류세포주,제비적단극륭항체구유교고적순도화활성.
