CAJ | 학술논문

2010年4月至11月,江苏等地鸭、鹅发生了一种以产蛋率、采食量显著下降,出现脑炎样神经症状为特征的传染病.对发病鹅进行剖检观察,鸭胚尿囊腔途径接种发病鹅病料分离病原,电镜观察病毒粒子.对健康鹅接种分离病毒进行动物回归试验.在病毒核酸背景未知的情况下,应用非序列依赖性单引物扩增法结合DNA酶处理(DNase-sequence independent single primer amplificmion,DNase-SISPA)对病原基因进行扩增,并在此基础上设计了1对特异性引物对病毒基因进行PCR扩增.剖检结果发现病鹅的脑膜、肺脏、肝脏、心脏、卵巢等多器官出血,脾脏肿大坏死.含毒鸭胚尿囊膜超薄切片电镜观察显示:病毒粒子直径为50～60 nm.动物回归试验成功复制出该病并分离到病毒.应用DNase-SISPA方法发现了3个病毒相关基因片段,经序列比对分析,与黄病毒属(Flavivirus)坦布苏病毒(Tembusu virus)基因序列有很高的同源性,分别为96%、88%、93%.据此设计特异性引物扩增出一段985 bp基因片段,该片段与黄病毒属坦布苏病毒E基因的核苷酸同源性为91%,氨基酸同源性为97%.将分离的鹅黄病毒毒株命名为Goose/Jiangsu/804/2010(简称JS804).研究结果表明:此次鸭、鹅新发疫病的病原为一种新的黄病毒.
2010년4월지11월,강소등지압、아발생료일충이산단솔、채식량현저하강,출현뇌염양신경증상위특정적전염병.대발병아진행부검관찰,압배뇨낭강도경접충발병아병료분리병원,전경관찰병독입자.대건강아접충분리병독진행동물회귀시험.재병독핵산배경미지적정황하,응용비서렬의뢰성단인물확증법결합DNA매처리(DNase-sequence independent single primer amplificmion,DNase-SISPA)대병원기인진행확증,병재차기출상설계료1대특이성인물대병독기인진행PCR확증.부검결과발현병아적뇌막、폐장、간장、심장、란소등다기관출혈,비장종대배사.함독압배뇨낭막초박절편전경관찰현시:병독입자직경위50～60 nm.동물회귀시험성공복제출해병병분리도병독.응용DNase-SISPA방법발현료3개병독상관기인편단,경서렬비대분석,여황병독속(Flavivirus)탄포소병독(Tembusu virus)기인서렬유흔고적동원성,분별위96%、88%、93%.거차설계특이성인물확증출일단985 bp기인편단,해편단여황병독속탄포소병독E기인적핵감산동원성위91%,안기산동원성위97%.장분리적아황병독독주명명위Goose/Jiangsu/804/2010(간칭JS804).연구결과표명:차차압、아신발역병적병원위일충신적황병독.