厦门大学学报(自然科学版)
廈門大學學報(自然科學版)
하문대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY
2002年
4期
476-480
,共5页
甜菊%钙调蛋白基因%cDNA克隆%聚合酶链式反应(PCR)
甜菊%鈣調蛋白基因%cDNA剋隆%聚閤酶鏈式反應(PCR)
첨국%개조단백기인%cDNA극륭%취합매련식반응(PCR)
钙调蛋白(Calmodulin)是生物细胞内一种重要的调控蛋白,通过其与靶酶的相互作用控制细胞正常的生长发育及细胞对外界环境变化的反应.我们从甜菊顶芽和花芽中提取总RNA,逆转录合成cDNA第一链,以此为模板,参考GenBank上已发表植物的钙调蛋白基因序列合成5'端和3'端引物,利用多聚酶链式反应(PCR)扩增并克隆得到了甜菊钙调蛋白基因的两个异型基因.序列分析表明,它们均由450个核苷酸组成,编码148个氨基酸.在核苷酸序列上与迄今已知的多种植物钙调蛋白基因均有很高的同源性,同源率在83%以上,编码的氨基酸序列同源性更高,同源率高达95%以上.这两个基因之间存在差异,其核苷酸序列同源率为85%,编码区的氨基酸序列的同源率为99%,仅在第122个氨基酸由ALA代替了VAL.
鈣調蛋白(Calmodulin)是生物細胞內一種重要的調控蛋白,通過其與靶酶的相互作用控製細胞正常的生長髮育及細胞對外界環境變化的反應.我們從甜菊頂芽和花芽中提取總RNA,逆轉錄閤成cDNA第一鏈,以此為模闆,參攷GenBank上已髮錶植物的鈣調蛋白基因序列閤成5'耑和3'耑引物,利用多聚酶鏈式反應(PCR)擴增併剋隆得到瞭甜菊鈣調蛋白基因的兩箇異型基因.序列分析錶明,它們均由450箇覈苷痠組成,編碼148箇氨基痠.在覈苷痠序列上與迄今已知的多種植物鈣調蛋白基因均有很高的同源性,同源率在83%以上,編碼的氨基痠序列同源性更高,同源率高達95%以上.這兩箇基因之間存在差異,其覈苷痠序列同源率為85%,編碼區的氨基痠序列的同源率為99%,僅在第122箇氨基痠由ALA代替瞭VAL.
개조단백(Calmodulin)시생물세포내일충중요적조공단백,통과기여파매적상호작용공제세포정상적생장발육급세포대외계배경변화적반응.아문종첨국정아화화아중제취총RNA,역전록합성cDNA제일련,이차위모판,삼고GenBank상이발표식물적개조단백기인서렬합성5'단화3'단인물,이용다취매련식반응(PCR)확증병극륭득도료첨국개조단백기인적량개이형기인.서렬분석표명,타문균유450개핵감산조성,편마148개안기산.재핵감산서렬상여흘금이지적다충식물개조단백기인균유흔고적동원성,동원솔재83%이상,편마적안기산서렬동원성경고,동원솔고체95%이상.저량개기인지간존재차이,기핵감산서렬동원솔위85%,편마구적안기산서렬적동원솔위99%,부재제122개안기산유ALA대체료VAL.
