广州大学学报(自然科学版)
廣州大學學報(自然科學版)
엄주대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF GUANGZHOU UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2004年
6期
515-518
,共4页
风疹病毒%E1抗原%原核表达
風疹病毒%E1抗原%原覈錶達
풍진병독%E1항원%원핵표체
应用基因克隆技术,对风疹病毒E1抗原基因片段进行拼接及克隆表达.根据软件GOLDKEY预测E1抗原的主要抗原决定簇位点E1(243~286aa),再设计4条近60个碱基长引物,利用PCR仪延伸合成目的基因,酶切并构建重组表达载体,酶切与测序鉴定,再转化表达菌株BL21(pLYS),IPTG诱导表达,行SDS-PAGE检测到目的基因表达成功.结果实现了用基因克隆技术将含E1(243~286)片段的pETKDO载体向大肠杆菌的转化,IPTG诱导2 h,获得的表达量高.
應用基因剋隆技術,對風疹病毒E1抗原基因片段進行拼接及剋隆錶達.根據軟件GOLDKEY預測E1抗原的主要抗原決定簇位點E1(243~286aa),再設計4條近60箇堿基長引物,利用PCR儀延伸閤成目的基因,酶切併構建重組錶達載體,酶切與測序鑒定,再轉化錶達菌株BL21(pLYS),IPTG誘導錶達,行SDS-PAGE檢測到目的基因錶達成功.結果實現瞭用基因剋隆技術將含E1(243~286)片段的pETKDO載體嚮大腸桿菌的轉化,IPTG誘導2 h,穫得的錶達量高.
응용기인극륭기술,대풍진병독E1항원기인편단진행병접급극륭표체.근거연건GOLDKEY예측E1항원적주요항원결정족위점E1(243~286aa),재설계4조근60개감기장인물,이용PCR의연신합성목적기인,매절병구건중조표체재체,매절여측서감정,재전화표체균주BL21(pLYS),IPTG유도표체,행SDS-PAGE검측도목적기인표체성공.결과실현료용기인극륭기술장함E1(243~286)편단적pETKDO재체향대장간균적전화,IPTG유도2 h,획득적표체량고.