基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2007年
12期
1334-1338
,共5页
阮灿军%王抒%孙兰%杜冠华
阮燦軍%王抒%孫蘭%杜冠華
원찬군%왕서%손란%두관화
阿尔茨海默病%淀粉样前体蛋白%β-淀粉样肽%胆碱能%受体
阿爾茨海默病%澱粉樣前體蛋白%β-澱粉樣肽%膽堿能%受體
아이자해묵병%정분양전체단백%β-정분양태%담감능%수체
目的 观察阿尔茨海默病致病相关基因淀粉样前体蛋白(APP)基因的高表达致高度生成,对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性及M和N胆碱受体功能的影响,探讨β-淀粉样肽(Aβ)生成增加对细胞胆碱功能的作用.方法 采用Lipofectamine 2000试剂盒将携带野生型人APP基因的pCMV695质粒转染至人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中.以ELISA方法测定Aβ生成量.取稳定高表达Aβ细胞的克隆,用放射免疫法测定ChAT的活性;放射配基结合测定M、N乙酰胆碱受体结合.结果 与未转染APP的SH-SY5Y细胞相比,当Aβ生成量为对照的2～2.6倍时,SH-SY5Y-APP细胞中未观察到明确的细胞毒性形态学改变;ChAT活性无明显变化,但细胞M受体结合降低18.5%～21.8%(P＜0.05);N受体结合未出现明显变化.结论 单纯Aβ产生增加就可通过影响M受体结合功能而引起脑内胆碱能功能障碍.
目的 觀察阿爾茨海默病緻病相關基因澱粉樣前體蛋白(APP)基因的高錶達緻高度生成,對人神經母細胞瘤SH-SY5Y細胞的膽堿乙酰轉移酶(ChAT)活性及M和N膽堿受體功能的影響,探討β-澱粉樣肽(Aβ)生成增加對細胞膽堿功能的作用.方法 採用Lipofectamine 2000試劑盒將攜帶野生型人APP基因的pCMV695質粒轉染至人神經母細胞瘤SH-SY5Y細胞中.以ELISA方法測定Aβ生成量.取穩定高錶達Aβ細胞的剋隆,用放射免疫法測定ChAT的活性;放射配基結閤測定M、N乙酰膽堿受體結閤.結果 與未轉染APP的SH-SY5Y細胞相比,噹Aβ生成量為對照的2～2.6倍時,SH-SY5Y-APP細胞中未觀察到明確的細胞毒性形態學改變;ChAT活性無明顯變化,但細胞M受體結閤降低18.5%～21.8%(P＜0.05);N受體結閤未齣現明顯變化.結論 單純Aβ產生增加就可通過影響M受體結閤功能而引起腦內膽堿能功能障礙.
목적 관찰아이자해묵병치병상관기인정분양전체단백(APP)기인적고표체치고도생성,대인신경모세포류SH-SY5Y세포적담감을선전이매(ChAT)활성급M화N담감수체공능적영향,탐토β-정분양태(Aβ)생성증가대세포담감공능적작용.방법 채용Lipofectamine 2000시제합장휴대야생형인APP기인적pCMV695질립전염지인신경모세포류SH-SY5Y세포중.이ELISA방법측정Aβ생성량.취은정고표체Aβ세포적극륭,용방사면역법측정ChAT적활성;방사배기결합측정M、N을선담감수체결합.결과 여미전염APP적SH-SY5Y세포상비,당Aβ생성량위대조적2～2.6배시,SH-SY5Y-APP세포중미관찰도명학적세포독성형태학개변;ChAT활성무명현변화,단세포M수체결합강저18.5%～21.8%(P＜0.05);N수체결합미출현명현변화.결론 단순Aβ산생증가취가통과영향M수체결합공능이인기뇌내담감능공능장애.
