中国癌症杂志
中國癌癥雜誌
중국암증잡지
CHINA ONCOLOGY
2008年
4期
249-253
,共5页
翁艳洁%翁丹卉%夏曦%宋晓红%卢运萍%王世宣%马丁%王常玉
翁豔潔%翁丹卉%夏晞%宋曉紅%盧運萍%王世宣%馬丁%王常玉
옹염길%옹단훼%하희%송효홍%로운평%왕세선%마정%왕상옥
RNA干扰%外源基因%DsRed%短发卡状RNA
RNA榦擾%外源基因%DsRed%短髮卡狀RNA
RNA간우%외원기인%DsRed%단발잡상RNA
背景与目的:shRNA技术是近来发展的热点技术之一,但普遍采用的单位点shRNA干扰载体效果并不理想.本研究探讨三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用.方法:构建外源基因DsRed全长载体转染HEK293细胞.针对报告基因DsRed设计4个干扰载体,一个含有3段shRNA,另外3个分别含有此3段中1段shRNA.转染293/DsRed,荧光显微镜观察基因DsRed.应用实时定量PCR(Real-time PCR)和流式细胞仪(FACS)检测4个载体对DsRed基因在mRNA及蛋白水平干扰效应.结果:4个载体对靶基因DsRed在mRNA及蛋白水平均有干扰效应,且含有3段shRNA载体对DsRed基因干扰效率为(89±16)%,显著高于3个只含有1段shRNA载体[(50±23)%,(52±15)%,(55±27)%],差异有显著性(P<0.05).结论:三位点shRNA干扰载体可以提高对靶基因的干扰效率.
揹景與目的:shRNA技術是近來髮展的熱點技術之一,但普遍採用的單位點shRNA榦擾載體效果併不理想.本研究探討三位點短髮卡狀RNA在提高RNA榦擾效率中的作用.方法:構建外源基因DsRed全長載體轉染HEK293細胞.針對報告基因DsRed設計4箇榦擾載體,一箇含有3段shRNA,另外3箇分彆含有此3段中1段shRNA.轉染293/DsRed,熒光顯微鏡觀察基因DsRed.應用實時定量PCR(Real-time PCR)和流式細胞儀(FACS)檢測4箇載體對DsRed基因在mRNA及蛋白水平榦擾效應.結果:4箇載體對靶基因DsRed在mRNA及蛋白水平均有榦擾效應,且含有3段shRNA載體對DsRed基因榦擾效率為(89±16)%,顯著高于3箇隻含有1段shRNA載體[(50±23)%,(52±15)%,(55±27)%],差異有顯著性(P<0.05).結論:三位點shRNA榦擾載體可以提高對靶基因的榦擾效率.
배경여목적:shRNA기술시근래발전적열점기술지일,단보편채용적단위점shRNA간우재체효과병불이상.본연구탐토삼위점단발잡상RNA재제고RNA간우효솔중적작용.방법:구건외원기인DsRed전장재체전염HEK293세포.침대보고기인DsRed설계4개간우재체,일개함유3단shRNA,령외3개분별함유차3단중1단shRNA.전염293/DsRed,형광현미경관찰기인DsRed.응용실시정량PCR(Real-time PCR)화류식세포의(FACS)검측4개재체대DsRed기인재mRNA급단백수평간우효응.결과:4개재체대파기인DsRed재mRNA급단백수평균유간우효응,차함유3단shRNA재체대DsRed기인간우효솔위(89±16)%,현저고우3개지함유1단shRNA재체[(50±23)%,(52±15)%,(55±27)%],차이유현저성(P<0.05).결론:삼위점shRNA간우재체가이제고대파기인적간우효솔.
